国家自然科学基金(30171157) 作品数:12 被引量:63 H指数:5 相关作者: 刘赛 孙福生 王海桃 鞠传霞 黄翠丽 更多>> 相关机构: 青岛大学 青岛大学医学院附属医院 青岛市市立医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省自然科学基金 山东省中医药科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
扇贝裙边糖氨聚糖对泡沫细胞形成过程中血管内皮生长因子表达的影响(英文) 被引量:2 2007年 目的:研究扇贝裙边糖氨聚糖时氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的U937细胞泡沫化过程中血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨其抗动脉粥样硬化作用的机理。方法:采用U937细胞与80mg/L的ox-LDL孵育48h建立U937泡沫细胞模型。将培养的U937细胞随机分为六组,正常对照组、模型组(ox-LDL)、肝素对照组(ox-LDL加100mg/L肝素)和低、中、高浓度的SS-GAG药物组(ox-LDL加200mg/L,400mg/L,800mg/L的SS-GAG)。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞分泌的VEGF的量,观察不同浓度SS-GAG对U937细胞泡沫化过程中VEGF表达量的影响。结果:培养的U937泡沫细胞中VEGF的表达量明显高于正常U937细胞(P<0.01),而加入SS-GAG的药物组和肝素对照组则有不同程度降低,以800mg/mL药物组降低最为明显(P<0.01)。结论:泡沫细胞形成过程中伴有VEGF的高表达,SS-GAG能够抑制其表达从而发挥抗动脉粥样硬化作用。 孙福生 刘赛 鞠传霞 于囡关键词:泡沫细胞 血管内皮生长因子 动脉粥样硬化 扇贝裙边糖胺聚糖对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响(英文) 被引量:9 2005年 目的 研究扇贝 (Placopectamagellanicus)裙边中提取的糖胺聚糖 (SS GAG)是否如肝素一样抑制血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖。方法 采用胎牛血清和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)所诱导的大鼠胸、腹主动脉VSMC增殖模型 ,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法观察SS GAG对VSMC增殖的影响 ,并运用免疫组织化学技术和计算机图像分析系统检测SS GAG对VSMC的增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板衍化生长因子 (PDGF)表达的影响。结果 SS GAG 5 0 ,10 0和 2 0 0mg·L- 1对 2 0 %胎牛血清和 5 0 μg·L- 1bFGF所诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用 ,并能抑制VSMC增殖时PCNA和PDGF的表达。结论 SS GAG能抑制VSMC的增殖 ,该作用可能是通过抑制PDGF和PCNA的表达而实现的。 黄翠丽 刘赛关键词:扇贝裙边糖胺聚糖 主动脉 增殖细胞核抗原 血小板衍化生长因子 扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中TNF-α、IL-6和IL-8表达的影响 被引量:5 2008年 目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的U937泡沫细胞形成过程中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,以探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化作用的机制。方法:采用U937细胞与80mg/Lox-LDL孵育48h建立U937泡沫细胞模型。将培养的U937细胞分为5组:正常细胞对照组、模型组(ox-LDL)和低、中、高浓度的SS-GAG药物组。分别检测不同处理组细胞分泌的TNF-α、IL-6和IL-8的含量。结果:培养的U937泡沫细胞中TNF-α、IL-6和IL-8表达量明显高于正常细胞组,而药物组中TNF-α、IL-6和IL-8表达量则明显降低,以800μg/mL药物组降低最为明显(P<0.01)。结论:SS-GAG能降低泡沫细胞形成过程中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的表达从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。 孙福生 鞠传霞 刘赛关键词:扇贝裙边糖胺聚糖 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-6 白细胞介素-8 动脉粥样硬化 扇贝裙边中糖胺聚糖的气相色谱定性定量分析及红外光谱分析 被引量:17 2004年 目的 对栉孔扇贝和海湾扇贝裙边中提取分离的糖胺聚糖进行化学组成及结构研究。方法 样品经盐酸-甲醇试剂醇解成单糖,采用标准对照法及内标法进行气相色谱定性定量测定。样品经KBr压片,红外光谱扫描(4000-500cm-1)。结果测定出栉孔扇贝糖胺聚糖中单糖含量分别为鼠李糖0.75%,木糖0.63%,岩藻糖0.67%,甘露糖0.97%,葡萄糖1.11%,半乳糖1.59%。红外光谱测定结果显示,栉孔扇贝和海湾扇贝糖胺聚糖具有典型酸性黏多糖的吸收特征。结论从栉孔扇贝裙边中提取分离的糖胺聚糖,分子中含有中性糖基。与标准品的红外光谱进行比较,两种扇贝糖胺聚糖均与透明质酸的红外光谱相似。 李珊 刘赛关键词:糖胺聚糖 KB 栉孔扇贝 海湾扇贝 扇贝糖胺聚糖对平滑肌源性泡沫细胞形成及其功能的影响 被引量:7 2005年 目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS- GAG)对氧化低密度脂蛋白(Ox- LDL)诱导的猪血管平滑肌细胞泡沫化过程及其表达的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- PX)和一氧化氮 (NO)分泌含量的影响,以探讨SS GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。 方法:采用猪血管平滑肌细胞与 15mg/L的Ox -LDL孵育 72h,建立平滑肌源性泡沫细胞模型。将培养的平滑肌细胞分为 6组: 正常细胞对照组、模型组、肝素对照组和低、中、高浓度的SS GAG药物组。通过酶法测定不同处理组细胞内总胆固醇 (TC)、游离胆固醇 (FC)、胆固醇酯 (CE)含量及CE/TC,观察不同浓度SS- GAG对平滑肌细胞泡沫化过程中细胞内脂质代谢的影响。通过黄嘌呤氧化酶法、过氧化氢还原法、硝酸还原酶法,分别检测不同处理组细胞分泌的SOD、GSH- PX和NO的含量。 结果:培养的平滑肌源性泡沫细胞中TC、FC、CE和CE/TC均明显高于正常平滑肌细胞 (P<0. 01),CE/TC超过 50%,高达 62. 99%。而加入SS GAG的 3个药物组和肝素对照组则有不同程度降低,CE/TC均在 50%以下,抑制了泡沫细胞的形成,以800mg/LSS GAG组降低最为明显(P<0. 01)。SOD在各组中的表达差异无显著性意义 (P>0. 05)。泡沫细胞中GSH PX和NO的表达量明显低于正常平滑肌细胞(P<0. 01),而加入SS GAG的 孙福生 刘赛关键词:一氧化氮 动脉粥样硬化 扇贝裙边糖胺聚糖对U937泡沫细胞形成过程中抗氧化酶、NO和细胞内Ca^(2+)的影响 被引量:5 2007年 目的:研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)抗动脉粥样硬化作用机制。方法:将培养的U937细胞分为正常组、模型组和SS-GAG不同浓度组,除正常组外,其余组加入氧化低密度脂蛋白造模后给予相应浓度药物进行处理,分别采用不同方法测定各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和一氧化氮(NO)含量及Ca2+水平。结果:各组中SOD含量无显著性差别;SS-GAG组中GSH-Px活性和NO含量与模型组比较明显升高,而细胞内Ca2+水平则明显降低。结论:SS-GAG可能通过增强GSH-Px活性和NO释放,同时降低细胞内Ca2+水平而发挥抗动脉粥样硬化作用。 孙福生 刘赛 鞠传霞 王海桃关键词:扇贝裙边糖胺聚糖 抗氧化酶 一氧化氮 CA^2+ 栉孔扇贝糖胺聚糖对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c-myc mRNA表达的影响 被引量:3 2007年 目的观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc) mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MTT法观察bFGF、SS-GAG对VSMC增殖活性的影响;用原位杂交方法观察SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA表达的影响。结果bFGF模型组细胞活性最高,与正常对照组比较,差异有统计学意义,不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性均低于模型组细胞,差别有统计学意义;bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA基因表达强度明显高于对照组;与模型组比较,SS-GAG作用后,增殖的VSMC内c-myc mRNA表达强度和阳性细胞数量均减少,差别有统计学意义。结论bFGF对VSMC有明显的促增殖作用,SS-GAG能显著抑制VSMC增殖,且对bFGF诱导增殖的VSMC的c-myc mRNA的阳性表达有抑制作用。 丁守怡 刘赛 张文卿 杨英 孟林 吕锐关键词:血管平滑肌细胞 原癌基因 栉孔扇贝裙边糖胺聚糖对血管平滑肌增殖及TNFα mRNA表达的影响 被引量:5 2006年 目的观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖作用及对肿瘤坏死因子(TNF)mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG对抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的平滑肌细胞增殖模型,分别用MTT法和原位杂交方法观察SS-GAG对血管平滑肌增殖活性及对(bFGF)诱导增殖的VSMC内(TNF)mRNA表达的影响。结果不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性明显低于模型组细胞,差别有统计学意义(P<0.05,P<0.01);低、高剂量SS-GAG组TNFmRNA基因表达明显低于模型组(P<0.01),表达强度和阳性细胞数量均减少。结论SS-GAG对VSMC增殖和由bFGF诱导增殖的VSMC内TNFmRNA表达均有抑制作用,且随着SS-GAG浓度的升高抑制作用增强。 丁守怡 刘赛 张文卿 杨英 王丽娜 王海桃关键词:碱性成纤维细胞生长因子 血管平滑肌细胞 原位杂交 扇贝糖胺聚糖对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响 被引量:6 2006年 Aim:To study the antiatherosclerosis mechanism of scallop skirt glycosaminoglycan(SS-GAG)by observing the effect of SS-GAG on the oxidation of low density lipoprotein in macrophage and on the activities of glutathion peroxidase(GSH-PX)and myeloperoxidase(MPO).Methods:The cell line was established by in vitro culturing mouse macrophage RAW264.7 was employed to study the effects of SS-GAG on the oxidation of LDL and the activities of relevant enzymes in macrophage via the assay of concentrations of malonaldehyde(MDA),conjugated diene,activity of GSH-PX,and MPO.Results:After macrophage incubation with LDL for 24 h,we found the enhanced activity of MPO,decreased activity of GSH-PX,and increased production of lipid peroxidation.Moreover,SS-GAG could increase the activity of GSH-PX but attenuate the activity of MPO.The decreased production of lipid peroxidation were also observed.There also existed dose-effect relationship in our findings.Conclusion:SS-GAG could depress the oxidation of LDL by degrading the activity of MPO and increasing the activity of GSH-PX.This may be one of its mechanisms of antiatherosclerosis action. 汪韶君 刘赛 孙福生关键词:糖胺聚糖 动脉粥样硬化 低密度脂蛋白 巨噬细胞 扇贝裙边提取物抗动脉粥样硬化作用及其机理研究 被引量:18 2002年 目的 探讨扇贝裙边提取物(ESS)抗动脉粥样硬化(AS)作用,并研究其对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法 1.通过喂饲高脂饲料建立鹌鹑AS模型,观察ESS对血脂水平、组织中脂质含量及动脉粥样硬化斑块形成的影响。2.采用20%胎牛血清(FBS)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)所诱导的大鼠VSMCs增殖模型,通过细胞计数、结晶紫染色及MTT比色法研究ESS抑制VSMCs增殖作用,并运用免疫组织化学技术(LSAB法)观察ESS对增殖VSMCs的增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响。结果 1.与模型组比较,ESS组动物主动脉、冠状动脉内膜AS斑块形成程度明显减轻(P<0.05、P<0.01),血清总胆固醇(TC)、甘油三酯TC、TG含量均显著降低(P<0.05、P<0.01)。2.ESS各剂量组VSMCs数目及吸光度均明显少于模型组(P<0.05、P<0.01),并能逆转VSMCs增殖时PCNA、PDGF的表达增强(P<0.01)。结论 ESS具有明显调血脂、抗AS作用,并能显著抑制VSMCs增殖。提示ESS的抗AS作用可能与其调血脂、抑制VSMCs增殖有关。 黄翠丽 刘赛 张健 刘占涛 仲伟珍 于树君关键词:ESS 动脉粥样硬化 血管平滑肌细胞 增殖细胞核抗原 血小板衍化生长因子 碱性成纤维细胞生长因子