国家自然科学基金(81100924) 作品数:34 被引量:105 H指数:6 相关作者: 王岩峰 杨明超 秦光华 王喆 张玉强 更多>> 相关机构: 中国医科大学附属第一医院 中国医科大学 沈阳市第七人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
BDNF对大鼠急性脊髓损伤后NF-κB表达的影响 2013年 目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对急性脊髓损伤大鼠核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达的变化。方法参照Nystrom压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,成年健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,按随机数字表法分为正常对照组8只、损伤组32只、BDNF组32只。免疫组化和Western blot检测各组大鼠NF-κB的表达。结果免疫组化结果显示:损伤组与BDNF组NF-κB阳性产物的平均光密度值(mean optic density,MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而BDNF组与损伤组相比A值明显降低(P<0.01);Western blot结果显示:与正常对照组比较,损伤组与BDNF组NF-κB的灰度值(integrated density value,IDV)与内参照IDV的比值明显升高(P<0.01),而BDNF组则明显低于损伤组(P<0.01)。结论 BDNF很可通过下调NF-κB的表达参与脊髓继发性损伤。 王岩峰 秦光华 张玉强 杨明超 王喆关键词:脊髓损伤 脑源性神经营养因子 核转录因子-ΚB 医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎软骨MMP-1、MMP-3与MMP-13表达的影响 被引量:6 2018年 目的观察医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎关节软骨基质金属蛋白酶1/3/13(MMP-1/3/13)表达的影响。方法成年新西兰大白兔36只,随机分为对照组12只、骨性关节炎组12只与医用臭氧水治疗组12只。采用Hulth法将骨性关节炎组与医用臭氧水治疗组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型。待造模成功后,医用臭氧水治疗组向兔膝关节腔内注射医用臭氧水2ml,注射浓度为20μg/ml,一周一次,共治疗3次,骨性关节炎组兔关节腔内注射空气;对照组实验动物不作处理。在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次干预1周后,用空气栓塞法处死实验兔,取下实验兔右膝关节软骨进行组织匀浆,采用Western blot与real time PCR方法测定关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的含量变化。结果与对照组相比,造模成功后的骨性关节炎组和医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著降低,P<0.01;与骨性关节炎组相比,采用医用臭氧水治疗后,医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著升高,P<0.01。骨性关节炎组大鼠膝关节软骨组织中MMP-1、MMP-3与MMP-13的蛋白与m RNA表达水平比对照组明显升高,而医用臭氧水治疗组比骨性关节炎组显著降低,P<0.01。结论医用臭氧水对骨性关节炎的治疗作用可能与降低早期骨性关节炎关节软骨中MMP-1、MMP-3与MMP-13的表达水平相关。 李博 李海群 闫玉山 张志仕 王中新 程艳秋 李丽 刘芳 王岩峰关键词:骨性关节炎 MMP-1 MMP-3 MMP-13 移植NRG1转染的雪旺细胞对脊髓损伤大鼠mTOR信号通路的影响 被引量:1 2018年 目的探讨移植NRG1转染的雪旺细胞对脊髓损伤大鼠mTOR信号通路的影响。方法体外分离培养雪旺细胞,免疫荧光鉴定;将pcDNA3.1-NRG1重组质粒通过Fugen6转染雪旺细胞,用免疫荧光法检测细胞转染率。参照Nystrom's压迫方法制作大鼠脊髓压迫损伤模型,于伤后第7天移植转基因雪旺细胞,细胞移植7周后结束实验,每周对实验动物进行BBB评分。实验分为假手术组、脊髓损伤组与转基因雪旺细胞移植组。Western blot方法检测各组大鼠脊髓损伤部位p-mTOR蛋白的表达。结果成功实现激活态雪旺细胞体外分离、培养和鉴定,并成功转染雪旺细胞,细胞转染率为62.25%。与脊髓损伤组相比,在细胞移植后的第3周开始,转基因雪旺细胞移植组大鼠的BBB评分显著升高(P<0.05)。与假手术组比较,脊髓损伤组与转基因雪旺细胞移植组大鼠脊髓损伤部位p-mTOR的蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但转基因雪旺细胞移植组比脊髓损伤组显著升高(P<0.05)。结论移植NRG1转染的雪旺细胞能够有效促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复,其机制可能与激活mTOR信号通路有关。 尤福利 杨明超 李毅 周鑫 吴立莹 王岩峰关键词:脊髓损伤 雪旺细胞 转染 MTOR miR-124靶向调节STAT3基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响 被引量:5 2018年 目的探讨miR-124及STAT3在骨肉瘤组织中的表达,以及miR-124对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测67例患者骨肉瘤组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,免疫组织化学方法检测STAT3蛋白的表达。使用脂质体将miR-124抑制剂及miR-124模拟物转染至骨肉瘤MG-63细胞株,以无关序列作为阴性对照。Western blot方法检测转染后STAT3蛋白的表达变化,采用MTT方法与Transwell实验检测转染后MG-63细胞的增殖侵袭能力变化。结果 miR-124在骨肉瘤组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.01);STAT3蛋白在骨肉瘤组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);转染miR-124抑制剂的MG-63细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著升高,细胞内STAT3蛋白表达亦明显升高;转染miR-124模拟物后则得到相反的结果(P<0.01)。结论 miR-124抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和侵袭可能与下调STAT3的表达相关。 李毅 赵维彪 王岩峰关键词:骨肉瘤 MG-63细胞 STAT3 增殖 Ephrin-B1在大鼠脊髓损伤的表达 被引量:1 2012年 [目的]探讨红细胞生成素诱导肝癌细胞株配体-B1(Ephrin-B1)在大鼠脊髓损伤的表达变化。[方法]将60只成年Wistar大鼠分正常组、假手术组、伤后3、7、14 d及28 d组。假手术组大鼠不损伤脊髓,损伤组大鼠采用Allen's氏打击法损伤T10脊髓。分别在各个时间点取材,免疫荧光和Western Blot检测Ephrin-B1蛋白表达情况。[结果]免疫荧光结果显示Ephrin-B1在正常、假手术和损伤脊髓的灰质和白质中均有表达,但在损伤脊髓组织中表达较高,脊髓组织中的星形胶质细胞表达Ephrin-B1。Western Blot显示损伤组比对照组Ephrin-B1蛋白含量显著增加(P<0.01),从伤后3 d开始持续到伤后28 d;伤后14 d蛋白含量达到高峰,明显高于对照组及伤后其他组(P<0.01);伤后28 d蛋白含量较14 d减少(P<0.01),与伤后7 d相比无显著性差异(P>0.05)。[结论]Ephrin-B1在大鼠脊髓损伤后表达升高,伤后14 d表达升高显著,表达于脊髓的星形胶质细胞。 张玉强 吕刚 王岩峰 范仲恺 智晓东 曹阳关键词:脊髓损伤 免疫荧光 WESTERN BLOT LY-294002对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2表达的影响 被引量:2 2013年 目的研究LY-294002对急性脊髓损伤大鼠Bcl-2表达的变化。方法选取104只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8、T9)急性压迫损伤模型,按随机数字表法分为假手术组8只、损伤组48只、LY-294002组48只。免疫组化和Western印迹方法检测各组大鼠脊髓损伤部位Bcl-2的表达。结果免疫组化结果发现,假手术组大鼠脊髓有大量的Bcl-2阳性表达的神经细胞;而在脊髓损伤后2 h时,Bcl-2阳性细胞数已开始明显减少,在3 d时Bcl-2阳性表达细胞数最少,5 d时Bcl-2阳性表达细胞数开始增加。在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Bcl-2阳性细胞明显高于相同时间点的脊髓损伤组大鼠。Western印迹方法检测结果与免疫组化方法一致。结论 LY-294002能够上调急性脊髓损伤大鼠Bcl-2蛋白的表达。 王岩峰 秦光华 杨明超 王喆关键词:脊髓损伤 BCL-2 环氧合酶-2抑制剂对大鼠骨关节炎模型软骨中血管内皮生长因子表达的影响 被引量:2 2014年 目的研究环氧合酶-2抑制剂(吲哚美辛)对大鼠骨关节炎模型关节软骨中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法健康雄性wistar大鼠30只,随机均分为对照组、骨性关节炎组(OA组)和吲哚美辛处理组。利用膝关节注射4%的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数(MAI),免疫组化方法与Western blot方法检测关节软骨中VEGF蛋白的表达变化。结果 OA模型组随着造模的时间延长,关节出现了重度红肿现象,对照组关节无任何异常变化;与OA模型组比较,吲哚美辛组的关节炎症反应呈现消退现象。VEGF蛋白在对照组大鼠关节软骨仅有微量表达,而在术后8周OA组大鼠关节软骨表达则显著升高(P<0.01);与OA组相比,吲哚美辛组大鼠关节软骨中VEGF蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论吲哚美辛对骨关节炎的抑制作用可能与下调VEGF蛋白的表达相关。 王岩峰 张玉强 秦光华 杨明超 王喆关键词:骨性关节炎 吲哚美辛 血管内皮生长因子 医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎软骨IL-1β、TNF-α与VEGF表达的影响 被引量:16 2018年 目的观察医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎关节软骨白细胞介素(IL)-lβ、肿瘤坏死因子(TNF)-α与血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法成年新西兰大白兔36只,随机分为对照组12只、骨性关节炎组12只与医用臭氧水治疗组12只。采用Hulth法将骨性关节炎组与医用臭氧水治疗组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型。待造模成功后,医用臭氧水治疗组向兔膝关节腔内注射医用臭氧水2ml,注射浓度为20μg/ml,一周一次,共治疗3次,骨性关节炎组兔关节腔内注射空气;对照组实验动物不作处理。在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次干预1周后,用空气栓塞法处死实验兔,取下实验兔右膝关节软骨进行组织匀浆,采用Western blot与real time PCR方法测定关节软骨中IL-lβ、TNF-α和VEGF的含量变化。结果与对照组相比,造模成功后的骨性关节炎组和医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著降低;与骨性关节炎组相比,医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著升高。膝关节软骨组织中IL-lβ、TNF-α和VEGF的蛋白与m RNA表达水平骨性关节炎组比对照组明显升高,医用臭氧水治疗组比骨性关节炎组显著降低。结论医用臭氧水对骨性关节炎的治疗作用可能与降低早期骨性关节炎关节软骨中IL-lβ、TNF-α和VEGF的表达水平相关。 李海群 张志仕 李博 王中新 程艳秋 李丽 刘芳 王岩峰关键词:骨性关节炎 吲哚美辛对大鼠骨关节炎模型关节软骨中IL-6表达的影响 被引量:4 2014年 目的研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂对大鼠骨关节炎模型关节软骨中白介素-6(IL-6)表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、骨性关节炎组(OA组)和COX-2抑制剂(吲哚美辛)处理组,每组10只。利用膝关节注射4%的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数,Western blot方法检测关节软骨中IL-6蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测关节软骨中IL-6 mRNA的表达变化。结果 OA模型组随着造模时间的延长,关节出现了重度红肿现象,对照组关节无任何异常变化;与OA模型组比较,吲哚美辛组的关节炎症反应呈现消退现象。术后8周检测关节软骨中IL-6蛋白及mRNA表达的变化,结果发现IL-6蛋白及mRNA在对照组大鼠关节软骨中仅有微量表达,而在OA组大鼠关节软骨表达则显著升高(P<0.01);与OA组相比,吲哚美辛组大鼠关节软骨中IL-6蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论吲哚美辛可通过下调IL-6蛋白的表达参与骨关节炎的发病机制。 王岩峰 王喆 杨明超 秦光华 张玉强关键词:骨性关节炎 吲哚美辛 白介素-6 WISTAR大鼠 MicroRNA与支气管哮喘的研究进展 被引量:2 2017年 MicroRNA(miRNA)是一类内源性高度保守的单链小分子非编码RNA,在细胞生长、增殖、代谢、凋亡等生物学过程中发挥重要作用。大量miRNA的异常表达与哮喘相关,一些miRNA参与了哮喘的气道炎症反应,分别发挥着促炎作用或抗炎作用,还有一些miRNA参与了哮喘的气道重塑进程。本文主要就miRNA在支气管哮喘的气道炎症反应及气道重塑两方面的研究进行综述。 李佳桐 张宝慧 常莉关键词:支气管哮喘 MICRORNA 气道炎症反应 气道平滑肌细胞 气道高反应 哮喘模型