浙江省自然科学基金(Y2100379)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：浙江中医药大学附属第一医院中国计量学院更多>>
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- 瘦素对乙醛诱导肝星状细胞活化过程中Ⅰ型胶原及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的:观察瘦素对乙醛诱导肝星状细胞(HSC)活化过程中α-SMA和I型胶原表达的影响,旨在从体外探讨瘦素在酒精性肝病中的可能作用。方法:采用SD大鼠肝脏原位灌流消化的方法获得并原代及传代培养HSC,分乙醛(200μmol/L)处理组,瘦素(100nmol/L)处理组及联合处理组(乙醛200μmol/L加瘦素100nmol/L)。用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA(α-平滑肌肌动蛋白)mRNA表达水平,Western blot检测各组细胞α-SMA表达量,ELISA法检测培养上清中TGF-β1及Ⅰ型胶原含量。结果:①乙醛处理组中TGF-β1和Ⅰ型胶原基因及蛋白表达量明显高于空白对照组(P<0.05),α-SMA表达量与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);②瘦素处理组TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA表达量与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05);③联合处理组TGF-β1、Ⅰ型胶原及α-SMA表达量明显高于对照组(P<0.05),但TGF-β1、Ⅰ型胶原表达量与乙醛处理组相比差异无显著性意义(P>0.05)。结论:在乙醛诱导肝星状细胞活化过程中,瘦素能协同上调α-SMA的表达;但对TGF-β1及Ⅰ型胶原的表达无影响,Ⅰ型胶原和α-SMA的表达可能是依赖于不同的调控机制来实现。
- 李善高曹海军刘军胡华军吕宾孟立娜
- 关键词：瘦素乙醛肝星状细胞
- 四甲基吡嗪对大鼠肝星状细胞肌细胞增强因子2A及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- [目的]观察肌细胞增强因子2A(Myocyte enhancer factor 2A、MEF2A)在肝星状细胞(Hepatic StellateCell、HSC)活化过程中的可能作用及四甲基吡嗪对其影响,进一歩探讨四甲基吡嗪抗肝纤维化的作用机制。[方法]采用SD大鼠肝脏原位灌流消化法获得HSC,并原代及传代培养,分离的HSC在塑料细胞培养皿中培养后逐步活化,分别收集新分离(0d)和经培养(1、2、3、4、5、6、7、8d)的HSC,观察MEF2A与HSC活化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle action、α-SMA)表达的关系;取传2～4代HSC,加四甲基吡嗪至终浓度50、100、150、200mg/L,分组培养48h,观察四甲基吡嗪对HSC增殖抑制作用的同时,对MEF2A基因及蛋白表达的影响。[结果]①随着HSC培养逐步活化,细胞内MEF2A及α-SMA逐步增加,二者呈正相关(r=0.90,P<0.05),且MEF2ADNA结合活性同步增强。②随着四甲基吡嗪浓度增加,对HSC增殖的抑制作用增强,同时对MEF2A表达抑制作用逐渐增强。[结论]MEF2A可能参与了HSC活化过程,四甲基吡嗪抑制HSC增殖作用可能与有效抑制MEF2A表达有关。
- 李善高曹海军刘军胡华军吕宾孟立娜
- 关键词：四甲基吡嗪肝星状细胞Α-平滑肌肌动蛋白
- HRM技术在瘦素基因启动子多态性与肝硬化发生相互关系研究中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨PCR-高分辨率熔解曲线分析(HRM)技术筛选和分析肝硬化患者瘦素基因启动子C2549和G2548位点突变的可能性,同时研究突变基因型与肝硬化患者生理生化指标之间的关系。方法:采用PCR-HRM新型技术,同时对比传统方法 PCR-限制性片段长度多态性分析(RFLP),对对照组(n=100)和肝硬化组(n=100)瘦素基因启动子C2549和G2548位点突变进行分析,同时检测生理生化指标。结果:(1)PCR-HRMA技术能够有效、高通量、准确地实现对瘦素基因启动子多态性的检测;(2)肝硬化患者瘦素基因启动子主要突变位点在C2549,而G2548位点没有发现突变;(3)肝硬化组中瘦素、游离瘦素指数(FLI)、空腹胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)高于对照组,胰岛素敏感指数(ISI)及可溶性瘦素受体(sOB-R)低于对照组,除瘦素外,均有显著差异(P<0.05);FLI与FINS和HOMA-IR呈正相关(r=0.45、r=0.53,均P<0.05),与ISI呈负相关(r=-0.34,P<0.05);(4)肝硬化患者C2549杂合型占优势,肝硬化纯合型和杂合型突变个体中HOMI-IR、瘦素、sOB-R及FLI均高于野生型,除瘦素及sOB-R外均有显著差异(P<0.05)。结论:PCR-HRM能准确及高通量地实现对瘦素基因启动子多态性进行分析,并验证了A位点基因频率的增高可能和肝硬化发生有关;肝硬化患者存在高胰岛素血症及胰岛素抵抗,瘦素可能与肝硬化患者胰岛素抵抗发生有关。
- 李善高曹海军刘军徐国萍孙明洪朱孝鸿吕宾孟立娜
- 关键词：高分辨率熔解曲线分析瘦素基因启动子肝硬化
