国家自然科学基金(81202093)
- 作品数：5 被引量：20H指数：2
- 相关作者：张帆李娟李娟雷荣余天更多>>
- 相关机构：华中科技大学武汉爱尔眼科医院华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 唑来膦酸钠联合碳酸钙D3片治疗骨质疏松症的疗效及其骨生化指标的变化被引量：17
- 2021年
- 目的研究唑来膦酸钠联合碳酸钙D3治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)的疗效及其对骨代谢标志物(bone metabolic markers,BMMs)和骨转换标志物(bone turnover markers,BTMs)水平的影响。方法选取2017年6月至2019年1月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的160例OP患者,随机分为观察和对照组,每组80例,观察组给予碳酸钙D3片联合唑来膦酸钠治疗,对照组给予碳酸钙D3片治疗。比较两组患者的股骨颈、腰椎(L2~L4)骨密度,并分析血清BMMs(TRACP-5b、OC、BAP)和BTMs(CTX、PⅠNP、NTX)变化。评估疼痛视觉模拟量表(VAS)评分以及统计分析两组不良反应发生情况。结果两组患者经治疗后VAS评分显著降低,其中观察组在治疗后第3和第6个月的VAS评分均显著低于对照组(均P<0.01)。两组患者治疗后右股骨颈、腰椎正位(L2~L4)骨密度均显著增加,其中观察组患者在治疗后第6个月的骨密度显著高于对照组(均P<0.05)。两组患者治疗后BMMs指标(TRACP-5b、OC)和BTMs(CTX、PⅠNP、NTX)水平显著降低,而BAP显著增加,其中观察组患者在治疗后6个月的各血清指标水平均显著优于对照组(均P<0.05)。主要不良反应为肌肉酸痛、发热、头痛头晕、恶心呕吐,其中观察组发热和肌肉酸痛发生率显著高于对照组(均P<0.05),而骨折发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论唑来膦酸钠联合碳酸钙D3治疗OP疗效显著,改善血清BMMs和BTMs水平,促进骨形成和提高骨密度,可有效降低OP患者疼痛和骨折风险。
- 林家民李娟张帆
- 关键词：唑来膦酸钠骨质疏松症骨代谢指标骨转换标志物
- siRNA抑制骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达及其生物学作用研究被引量：1
- 2018年
- 背景与目的:sirtuin6(SIRT6)蛋白是对人体细胞生长、代谢调控及应激反应等具有重要作用的一种核蛋白,常在细胞核中发挥多种调控作用。但该蛋白在骨肉瘤中的作用还不清楚,本研究通过下调人骨肉瘤U2OS细胞系中SIRT6的表达,观察其对U2OS细胞的作用。方法:设计合成SIRT6的si RNA序列,通过Lipofectamine^(TM)2000转染U2OS细胞系,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测SIRT6蛋白的表达情况,利用流式细胞术检测细胞凋亡,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力,CCK-8法分析对紫杉醇的敏感性。结果:成功构建SIRT6 si RNA序列,Western blot检测转染后24、48和72 h的蛋白水平,实验组较对照组明显降低。流式细胞术检测细胞凋亡也显示实验组凋亡增加(P<0.05)。Transwell法检测结果显示,实验组侵袭与迁移能力较对照组下降(P<0.05)。CCK-8法检测细胞生长情况,可见经紫杉醇处理后实验组生长较对照组下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:下调骨肉瘤U2OS细胞中SIRT6的表达可以抑制骨肉瘤细胞侵袭,促进凋亡,并增强骨肉瘤细胞对紫杉醇的化疗敏感性。
- 余天李娟张伟凯张帆
- 关键词：骨肉瘤SIRNA
- 放射线诱导的HtrA2基因表达对人葡萄膜黑色素OCM-1细胞的影响被引量：2
- 2014年
- 背景与目的:葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)是成人最常见的眼内原发性恶性肿瘤,其恶性程度高,转移早。放射治疗是多年来葡萄膜黑色素瘤最常用的方法之一,但辐射抗性和受照部位正常组织的损伤是长期困扰UM放疗的问题。本实验运用放射线可调控的HtrA2基因联合疗法,探讨其对UM的抑制作用。方法:含Egr1启动子的pIRES-Egr1-Omi/HtrA2(pEgr1-HtrA2)质粒体外转染入OCM-1细胞,转染后的细胞暴露于不同剂量的放射线中。将移植瘤模型小鼠分为对照组、放射组、基因组和基因放射组,每组10只。应用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测HtrA2基因的mRNA表达和蛋白表达。流式细胞仪检测联合处理后的OCM-1细胞凋亡情况。通过克隆形成实验检测HtrA2基因对放射敏感性的影响。在动物实验中测量联合治疗后肿瘤体积。结果:转染pEgr1-HtrA2质粒后,放射组HtrA2 mRNA表达在8 Gy达到高峰,且HtrA2蛋白表达较放射前明显增加(P<0.05),OCM-1细胞凋亡显著增加。克隆形成实验显示,HtrA2基因可增强OCM-1细胞放射敏感性。与对照组相比,基因放射组肿瘤生长被显著抑制(P<0.05)。结论:转染pEgr1-HtrA2质粒后可在放射线调控下增加HtrA2基因表达,并能增强OCM-1细胞对放射的敏感性,抑制肿瘤细胞生长。
- 雷荣李娟余天张帆
- 关键词：葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡
- Hsa_circ_0004674通过miR-1254调控EGFR对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响研究
- 2020年
- 目的探讨环形RNA(circRNA)检测hsa_circ_0004674通过微RNA-1254(miR-1254)调控表皮生长因子受体(EGFR)对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法通过微阵列分析筛选MG63细胞中差异表达的circRNA,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测hsa_circ_0004674在骨肉瘤细胞MG63和正常成骨细胞NHOst中的表达情况,分析hsa_circ_0004674对MG63细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响;miRanda预测hsa_circ_0004674和miR-1254之间的结合位点,双荧光素酶报告基因检测hsa_circ_0004674与miR-1254的相互作用,分析hsa_circ_0004674作为miR-1254的海绵对MG63细胞增殖、侵袭与迁移的影响;TargetScan预测miR-1254和EGFR之间的结合位点,双荧光素酶报告基因检测miR-1254与EGFR的相互作用,分析EGFR对MG63细胞增殖、侵袭与迁移的影响。细胞增殖、侵袭和迁移能力分别用细胞克隆形成实验、细胞侵袭实验和细胞划痕实验检测。CCK-8法检测过表达EGFR对MG63细胞活力的影响,Western blot法检测hsa_circ_0004674和miR-1254对EGFR表达的影响及过表达EGFR对MG63细胞中Bax、Bcl-2表达的影响。结果与NHOst细胞比较,MG63细胞中hsa_circ_0004674的表达水平上调(P<0.01),miR-1254的表达水平下调(P<0.01),EGFR mRNA表达水平上调(P<0.01),干扰hsa_circ_0004674或EGFR表达可使MG63细胞增殖、侵袭与迁移受抑制。miR-1254过表达也可抑制MG63细胞增殖、侵袭与迁移,而干扰miR-1254表达可促进MG63细胞增殖、侵袭与迁移;与仅干扰miR-1254表达比较,同时干扰hsa_circ_0004674和miR-1254的表达后,hsa_circ_0004674表达的下调能部分逆转miR-1254表达下调对细胞功能的影响。hsa_circ_00046743′UTR与miR-1254特异性结合,调控miR-1254的表达活性。miR-1254与EGFR 3′UTR特异性结合,调控EGFR的表达。miR-1254过表达降低MG63细胞的活力,EGFR过表达增加MG63细胞的活力。miR-1254过表达促进MG63细胞中Bax的表达,抑制Bcl-2的表达,而EGFR过表达抑制了MG63细胞中Bax的表�
- 张帆林家民马小虎李娟余天
- 关键词：MG63细胞细胞增殖肿瘤侵润细胞运动
- 拓扑替康通过调控缺氧诱导因子-1α影响U87MG细胞的增殖和迁移
- 2019年
- 目的:探讨拓扑替康(TPT)对神经胶质瘤细胞中的缺氧诱导因子-1(HIF-1α)及其相关信号通路的调控作用。方法:应用Western Blot技术分别检测不同浓度TPT作用下的U87MG细胞内HIF-1α、去乙酰化酶sirtuin1(SIRT1)、上皮转化因子Twist和涉及Warburg效应的下游蛋白己糖激酶Ⅱ(HK-Ⅱ)、乳酸脱氢酶A(LDHA)及丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)的表达,使用同位素标记法,测定TPT对U87MG细胞葡萄糖摄取、乳酸堆积、脂肪酸β氧化的影响,并测定低浓度的TPT作用下拓扑异构酶Ⅰ活性的变化。最后通过台盼蓝染色实验和细胞划痕实验分别检测拓扑替康对U87MG细胞增殖和迁移能力的影响。结果:以TPT处理U87MG细胞后,SIRT1的表达量增加,HIF-1α表达量减少。当U87MG以TPT处理时,涉及Warburg效应的下游蛋白HK-Ⅱ、LDHA及PDK1的表达量均减少。而且,在U87MG细胞中TPT也减缓了细胞增殖和TWIST蛋白的表达量。结论:拓扑替康可能通过抑制HIF-1α及其下游蛋白HK-Ⅱ、LDHA、PDK1的表达从而减少肿瘤的能量及脂肪酸来源,影响癌细胞的Warburg效应进而抑制癌细胞的增殖。
- 薛慧颖喻兆阳李娟
- 关键词：缺氧诱导因子胶质母细胞瘤拓扑替康
