国家自然科学基金(31000165) 作品数:9 被引量:38 H指数:4 相关作者: 邓传良 高武军 卢龙斗 秦瑞云 李书粉 更多>> 相关机构: 河南师范大学 新乡医学院 北京市辐射中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省教育厅自然科学基金 河南省高校科技创新团队支持计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
菠菜性别相关EST-SSR标记的开发及应用 被引量:16 2012年 为了明确菠菜EST序列中SSR的总体特点,开发菠菜EST-SSR引物;为利用EST-SSR引物进行菠菜性别相关特异序列的克隆奠定基础,本文从NCBI上获得1093条EST,利用在线软件SSRIT检测所含SSR序列,并进行分析。共检索出68条SSR序列,分布于64条EST中,检出率为6.22%,包括22种重复基元。其中二核苷酸重复基元的EST-SSR占主导地位,占总SSR数目的32.3%。利用在线引物设计软件Primer3.0设计了7对EST-SSR引物,在适合的PCR反应体系下,分别以雌、雄菠菜DNA基因组为模板,对设计的EST-SSR引物进行筛选,结果显示以EST序列HS097148设计的一对引物从菠菜雌雄基因组中扩增出一条雄性特异的条带,表明通过菠菜EST-SSR引物获得菠菜性别相关特异序列是可行的。 邓传良 高俊 曹莹 秦瑞云 高武军 卢龙斗关键词:菠菜 表达序列标签 微卫星 葎草单染色体的显微分离及DOP-PCR技术体系建立 2016年 葎草是具有XX/XY1Y2性染色体系统的雌雄异株植物,是研究植物性染色体演化的模式材料之一.利用染色体显微分离技术从葎草根尖有丝分裂中期分裂相中将单条染色体进行了显微分离及DOP-PCR(Degenerate oligonucleotide primer-PCR)扩增,并构建了单染色体DOP-PCR扩增产物的荧光探针,对葎草根尖有丝分裂中期分裂相染色体进行了荧光原位杂交,其结果表明荧光信号分布在所有的染色体上,表明所建立的技术体系能够成功分离葎草单染色体并进行DNA扩增.本研究结果为进一步进行葎草X,Y染色体的细胞及分子生物学研究提供了技术支持. 秦瑞云 李双双 李书粉 袁金红 高武军 邓传良关键词:葎草 单染色体 显微分离 DOP-PCR 葎草性别相关SRAP分子标记的鉴定 被引量:4 2014年 葎草是一种研究雌雄异株植物性别分化分子机制的理想材料。本研究以葎草雌、雄基因池为模板,采用序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记技术筛选与性别相关的分子标记,从256对引物组合中筛选出了50对可以稳定扩增出特异条带的引物组合,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,50对引物组合共扩增出671条带,247条呈现多态性,多态率为36.81%。后以葎草5个雄性单株、5个雌性单株为材料,采用琼脂糖凝胶电泳对引物组合me15+em11,me14+em16,me13+em12和me7+em10扩增结果再次进行验证,结果表明尽管扩增条带有所不同,但是雌、雄性特异条带是比较稳定的。对本研究中获得性别相关特异条带进行克隆、测序及染色体定位,将会有助于研究葎草性染色体演化的分子机制。 邓传良 任映雪 张卫丽 李书粉 高武军 卢龙斗关键词:葎草 雌雄异株 SRAP PEG6000对菠菜性别分化的影响及分子机制初探 2016年 菠菜(Spinacia oleracea L)是研究雌雄异株植物性别分化的模式材料,其性别分化不但受到性别决定基因的控制,还受到环境条件的影响,干旱是其中的一个重要因素,但是关于聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)模拟土壤干旱环境对菠菜性别分化影响的分子机制目前尚未见报道。试验以日本大叶菠菜(S.oleracea cv.Japanese leaves)为供试材料,利用不同浓度的PEG6000进行处理,研究干旱环境对菠菜性别分化的影响。采用温室盆栽种植方式,分别用5%、10%的PEG6000模拟土壤干旱环境对盆栽菠菜处理72 h,处理株数均为100株,并同时设置对照组。结果表明,与对照组雌雄比例(0.96)相比,PEG60005%处理组的雌雄比例(1.09)与10%处理组(0.97)均接近于对照组;对发生性反转数进行统计,结果表明,PEG6000 10%处理组低于5%处理组;利用菠菜Y染色体紧密连锁的雄性特异标记T11A对处理前、后的植株进行鉴定,发现菠菜植株出现了性反转现象,且均为雌株转变为雄株。琼脂糖凝胶电泳结果显示,性反转后,雄性特异条带也随之出现。试验首次对PEG6000模拟土壤干旱环境对菠菜性别分化影响的分子机制进行了探究,其研究结果对于进一步揭示菠菜性别分化机理具有重要意义。 王少净 张卫丽 刘新鑫 杜亚茹 王冰肖 李忠徽 闫宁宁 李书粉 高武军 邓传良关键词:OLERACEA 性反转 性别分化 菠菜性别相关SRAP分子标记的筛选及分析 被引量:7 2013年 菠菜(2n=2x=12)是研究雌雄异株植物性别分化的一种理想材料。本研究利用SRAP(sequence related amplified polymorphism)分子标记方法,采用256对引物组合对菠菜雌、雄基因池进行筛选,后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果表明,经过对256对引物组合进行筛选,其中20对引物组合扩增效果较好,共获得47个雌性特异片段和29个雄性特异片段,其多态性达到19.9%;在这20对引物组合中,引物对em11+me14、em10+me10经琼脂糖凝胶电泳验证扩增效果最好,可以扩增出菠菜雄、雌稳定的分子标记。本研究获得的性别特异标记可以用于菠菜幼苗期性别鉴定,同时为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础。 邓传良 曹莹 任映雪 秦瑞云 李书粉 高武军 卢龙斗关键词:菠菜 雌雄异株 SRAP 聚丙烯酰胺凝胶电泳 Fe^+离子注入诱变莲花突变体的SRAP分析 被引量:4 2011年 为了在分子水平上对离子注入诱变莲花突变体进行鉴定,本研究对同一剂量Fe+离子注入诱变的白洋淀红莲(Baiyangdian red lotus)突变体及其对照的基因组进行SRAP扩增,并利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对SRAP-PCR扩增产物进行分析。在优化好的SRAP体系基础上,从121对引物组合中筛选出了10对可以稳定扩增出显著特异条带的引物,引物多态性为8.26%;将这10对引物的扩增产物用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,共扩增出了215条带,多态性条带为83条,多态率为38.6%;突变体1扩增出141条带,和对照相比,特异条带共22条,条带变异率为15.6%,而突变体2~6的条带的变异率分别为16.4%、17.1%、16.9%、18.2%和20.5%。表明Fe+离子注入莲花种子可导致其基因组DNA发生变异,同一剂量Fe+离子注入诱变具有随机性。 贾彦彦 邓传良 高俊 任映雪 王宁娜 高武军 张涛 张涛 卢龙斗关键词:离子注入 SRAP Fe^+注入诱变莲花突变体的POD和SOD同工酶分析 被引量:1 2013年 以经Fe+注入诱变的白洋淀红莲(Nelumbo nucifera var.Baiyangdian)突变体幼嫩叶片为材料,提取过氧化物酶(POD)同工酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶,对莲花POD和SOD同工酶进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测不同莲花突变体POD和SOD同工酶酶谱的差异。结果表明,与对照相比,离子注入诱变后的白洋淀红莲不同突变体间POD和SOD同工酶酶谱发生了改变,在Rf为0.09处,M4、M6突变体同时出现了特异性POD同工酶酶带;在Rf为0.19处,M3、M5突变体同时出现了特异性POD同工酶酶带;在Rf为0.33处,M2、M3、M4、M5突变体同时出现了特异性的POD酶带;在Rf 0.55和0.63处,M1、M2突变体同时出现了POD酶带;在Rf为0.41处,M1、M2、M4、M5、M6突变体同时出现了特异性SOD同工酶酶带。离子注入诱变获得的不同莲花突变体可以用POD和SOD同工酶进行鉴定。 秦瑞云 邓传良 贾彦彦 高武军 卢龙斗关键词:VAR. 过氧化物酶同工酶 赤霉素(GA_3)对菠菜性别分化的影响及分子机制 被引量:2 2017年 以日本大叶菠菜为供试材料,采用温室内盆栽种植的方式,利用赤霉素(GA_3)进行处理,探讨其对雌雄异株植物菠菜性别分化的影响。结果表明,试验组在第1次处理后植株就有明显的生长,表现为植株茎秆变长、较对照组粗壮、开花期提前。与对照组相比,试验组雌雄比例(1.33)明显大于对照组(0.96)。此外,发生性反转植株中,雌株转变为雄株与雄株转变为雌株的比例为1.14。利用Y染色体紧密连锁的雄性特异T11A分子标记对性反转植株进行检测,结果表明,雌株转变为雄株,雄性特异条带出现;雄株转变为雌株,雄性特异条带消失。本研究结果为进一步研究激素对菠菜性别分化影响的分子机制奠定了基础。 秦瑞云 王少净 刘新鑫 杜亚茹 王冰肖 李忠徽 闫宁宁 李书粉 高武军 邓传良关键词:菠菜 性反转 性别分化 红花主要农艺性状与单株籽粒产量的相关和通径分析 被引量:7 2016年 为了分析不同红花品种主要农艺性状与单株籽粒产量的关系,对20个红花品种的10个农艺性状进行了相关和通径分析.结果证明,9个相关性状对单株籽粒产量的影响顺序是百粒重>单株有效果球数、二级分枝数>分枝长度>一级分枝数>茎粗>顶花球直径>株高>第一分枝高.多元回归分析表明,茎粗、一级分枝数、单株有效果球数、分枝长度、第一分枝高、百粒重为影响单株籽粒重的主要因素.通径分析发现,百粒重、一级分枝数对单株籽粒产量影响最大,因此,在适当控制茎粗、分枝长度、第一分枝高、单株有效果球数的基础上,将提高百粒重、一级分枝数作为红花品种的主要选育方向. 赵昕鹏 石晓卫 董天宇 高武军 邓传良 卢龙斗关键词:红花 农艺性状 单株籽粒产量 通径分析