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不同年龄段Beagle犬血压测定分析被引量：1: 2015年; Beagle犬是国际公认的实验用犬,常用于制备高血压实验动物模型。与诱发性高血压模型相比,自发性高血压模型更接近人类高血压疾病生理过程,如能获得遗传性自发高血压Beagle犬模型,将对人类高血压疾病研究具有重要意义。本文通过对300多只不同年龄段Beagle犬进行血压测定分析,结果表明血压总均值为161 mm Hg,并且随着Beagle犬年龄的增长而上升,为自发性高血压Beagle犬的研究提供一定的科研数据。; 胡敏华周治东倪庆纯刘运忠; 关键词：BEAGLE犬高血压疾病模型

念珠状链杆菌Taqman MGB荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用被引量：1: 2015年; 目的建立念珠状链杆菌的实时荧光定量PCR检测方法,实现该菌在多种实验动物中的快速检测。方法根据NCBI公布的念珠状链杆菌序列,设计特异性引物和探针,通过对24株标准参考菌株的扩增,验证其特异性、敏感性和重复性。运用所建立的方法对小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、长爪沙鼠和树鼩的共823份呼吸道样本进行检测。结果用所建Taqman MGB荧光定量PCR方法在小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔中未检出念珠状链杆菌;检出普通级长爪沙鼠和树鼩中念珠状链杆菌的阳性率分别为1.5%(1/65)和61.7%(37/60)。结论本研究所建立的念珠状链杆菌Taqman MGB荧光定量PCR检测方法,能够对实验动物中念珠状链杆菌进行快速准确的检测,敏感性优于国标方法,为实验动物质量检测体系的完善奠定了基础。; 邢进冯育芳岳秉飞贺争鸣戴方伟萨晓婴代解杰; 关键词：荧光定量PCR 实验动物

小鼠脑脊髓炎病毒RT-PCR方法的建立及初步应用被引量：2: 2015年; 目的建立小鼠脑脊髓炎病毒RT-PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI发表的TMEV GD VII株(GI:62039)基因组序列设计特异引物,建立RT-PCR方法,验证方法的敏感性和特异性;脑腔接种方式感染9只BALB/c小鼠,感染后第6天采集动物的脑、心、肝、脾、肺、肾、盲肠内容物和血清等样本,用建立的方法进行检测;同时检测100份小鼠盲肠内容物样本,对方法进行初步应用。结果以GD VII RNA为模板,建立的RT-PCR方法能够扩增出约371bp的单一目的条带,敏感性验证显示能够检测到的最低GD VII c DNA量为0.69pg/μL;以脑心肌炎病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、日本乙型脑炎病毒、小鼠诺如病毒及正常小鼠脑组织为对照进行方法特异性验证,均未出现目的条带。脑腔接种感染小鼠,所有小鼠在接种第3天均产生不同程度的精神萎靡后肢麻痹等症状,其中2只小鼠于第5天死亡;采集心、肝、脾、肺、肾、脑、盲肠内容物及血清等样本进行检测,所有小鼠的脑组织均检测到GD VII RNA,而其他组织均未检测到;对100份小鼠盲肠内容物进行检测,结果均为阴性。结论建立的TMEV GDVII株RT-PCR方法能够高效的检测小鼠组织中的病毒感染,可作为实验动物国家标准的有力补充。; 李晓波付瑞王吉卫礼王淑菁岳秉飞贺争鸣; 关键词：逆转录-聚合酶链式反应

广州地区比格犬的发情规律分析: 2014年; 统计分析400只比格犬种母犬3年的发情记录,以揭示比格犬的发情规律。结果显示:春季发情比例占35.62%、夏季占23.21%、秋季占14.89%、冬季占26.28%;100只母犬在1年中重复发情的有38只,重复发情间隔6-7个月的犬最多。; 胡敏华张志光陈召威刘运忠刘清神; 关键词：比格犬友情

获能培养液等因素对遗传工程小鼠冻融精子体外受精率的影响被引量：1: 2015年; 目的探讨遗传工程小鼠精子冷冻、复苏及体外受精率的效果,建立简便、经济的遗传工程小鼠保种体系。方法采用精子冷冻、体外受精和胚胎移植技术,比较了精子获能培养液、雄鼠周龄及精子冻存液等因素对于遗传工程小鼠精子冷冻保存的影响。结果用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液获能培养,体外受精率在82.49%-91.43%,而HTF精子培养液的体外受精率为14.46%-27.38%,同品系间差异极显著（P〈0.01）;10-35周龄的雄鼠精子均能成功冷冻、受精,移植后产仔;使用R18S3,CPM,CPA三种不同精子冻存液冷冻遗传工程小鼠精子,复苏后采用PM精子培养液体外受精,受精率分别是75.85%、88.89%和94.27%,移植后得到阳性小鼠;体外受精后的胚胎成功冷冻保存,移植后产仔。结论采用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液体外受精,能够更有效地保存遗传工程小鼠。; 左琴范涛张翠平杨文东王劲松范昌发刘佐民贺争鸣李保文; 关键词：精子冷冻保存体外受精胚胎移植

大鼠细小病毒H-1株和KRV株双重PCR检测方法的建立及应用被引量：5: 2015年; 目的建立大鼠细小病毒H-1和KRV株双重PCR方法并对方法进行初步应用。方法根据NCBI发表的H-1(NC_001358)和KRV(U790330)基因组序列分别设计特异引物,以H-1和KRV病毒DNA为模板建立双重PCR方法,对方法进行优化后验证方法的敏感性和特异性;经口感染大鼠,分为H-1和KRV单独感染组和混合感染组,感染后第2,4,6,8,10天采集大鼠粪便,第10天处死所有大鼠,采集心、肝、脾、肺、肾和盲肠内容物等组织,用建立的方法对粪便和组织样本进行检测。结果建立的双重PCR方法以H-1和KRV为模板能够分别扩增出183 bp和302 bp 2个条带,敏感性验证显示能够检测到的最低H-1量为3.8 pg/m L,最低KRV量为0.73 pg/m L;在以小鼠微小病毒、犬细小病毒和猫细小病毒为模板时无任何条带扩增出,特异性良好。感染第2天在所有大鼠粪便中均检测到病毒核酸,感染大鼠均无明显临床症状,感染第10天采集组织,H-1在各组织的检出率分别是心50%(4/8),肝50%(4/8),脾62.5%(5/8),肺50%(4/8),肾37.5%(3/8),盲肠内容物62.5%(5/8),且单独感染组检出率高于混合感染组;KRV在各组织的检出率分别是心0(0/8),肝25%(2/8),脾87.5%(7/8),肺12.5%(1/8),肾25%(2/8),盲肠内容物62.5%(5/8),混合感染组检出率高于单独感染组。结论建立的H-1和KRV双重PCR方法能够高效的检测大鼠粪便及组织中的病毒感染,可作为实验动物国家标准的有力补充。; 李晓波付瑞王吉卫礼王淑菁岳秉飞贺争鸣; 关键词：双重PCR

自发性Beagle犬前列腺增生模型的建立: 2014年; 到目前为止,研究证实能够随年龄增长自发形成前列腺增生的动物只有犬科动物以及包括人在内的灵长类动物。而Beagle犬是国际公认的实验用犬,因此,Beagle犬是研究自发性前列腺增生的极好模型。本文采用SIUI Apogee 3100V兽用全数字彩色多普勒超声诊断仪对Beagle犬前列腺大小进行测定,结果证实不同年龄段Beagle犬前列腺体积差异显著,且其体积随着年龄的增大而增加,为自发性前列腺增生模型提供基础数据。; 胡敏华龙海斌倪庆纯刘运忠; 关键词：BEAGLE犬多普勒超声诊断仪

同时检测猫细小病毒、杯状病毒、疱疹病毒1型多重PCR方法的建立被引量：14: 2014年; 为建立检测多种猫科病毒的多重PCR方法,本研究参照GenBank中登录的猫细小病毒(FPV)的NS基因序列、猫杯状病毒(FCV)的ORF2基因序列以及猫疱疹病毒(FHV-I)的TK基因序列设计合成3对引物,通过对反应体系及条件的优化,建立了可以同时扩增FPV(392 bp)、FCV(922 bp)和FHV-I(290 bp)的多重PCR方法。该检测方法结果表明:在同一PCR反应体系中可以同时检测出以上3种病毒,FPV、FCV和FHV的最低检出限分别为101.5TCID50、101.9TCID50和101.2TCID50。以该方法对黑龙江省各地区收集的120份血清进行检测,其中FPV、FCV和FHV-I的阳性率分别为5%(6/120)、2.5%(3/120)和4.1%(5/120),证明该方法可以用于3种病毒的检测,具有良好的特异性和敏感性。; 王翀刘大飞刘春国柴洪亮张洪英程景吕健华育平曲连东; 关键词：猫细小病毒多重PCR

卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展: 2014年; 玻璃化冷冻法是在急速降温过程中使溶液行成一种无冰晶的玻璃化状态,可以最大程度避免冰晶形成对细胞膜及细胞骨架结构的损伤。影响卵巢组织玻璃化冷冻保存效果的主要因素有卵巢组织块的大小、冷冻保护剂的种类、渗透平衡方法、冷冻载体等。卵巢组织结构较复杂,尚未形成统一的玻璃化冷冻程序。提出了目前存在的问题。; 王劲松左琴范涛李保文; 关键词：卵巢玻璃化冷冻影响因素

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国家科技支撑计划(2013BAK11B00)

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