王秀梅
作品数： 36被引量：101H指数：5
  • 所属机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
  • 所在地区:黑龙江省 哈尔滨市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

刘思国
作品数：377被引量：1,099H指数：17
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题：牛分枝杆菌 结核分枝杆菌 胸膜肺炎放线杆菌 鸡传染性支气管炎病毒 牛结核病
张万江
作品数：39被引量：155H指数：9
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题：肠球菌 葡萄球菌 链球菌 奶牛乳房炎 猪链球菌
廖晓萍
作品数：212被引量：400H指数：10
供职机构：华南农业大学
研究主题：大肠杆菌 增效剂 质粒 菌株 杀菌效果
刘雅红
作品数：319被引量：499H指数：12
供职机构：华南农业大学
研究主题：大肠杆菌 增效剂 菌株 质粒 杀菌效果
于申业
作品数：72被引量：146H指数：6
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题：单克隆抗体 鸡白痢沙门氏菌 杂交瘤细胞株 鸡传染性支气管炎病毒 旋毛虫
作品列表
多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点被引量：4
2014年
为调查多重耐药基因cfr在广东地区猪源肠球菌中的流行特点及分离株对临床常用药物的耐药情况,本研究通过对临床分离的8株携带cfr基因的肠球菌进行最小抑菌浓度(MIC)测定,脉冲凝胶电泳(PFGE)分型和southern杂交定位,确定分离株的耐药表型和cfr基因在肠球菌中的传播方式。研究表明,8株菌对氟苯尼考、庆大霉素和红霉素耐药率均为100%;对四环素、环丙沙星和利福平的耐药率高达75.0%以上。PFGE结果显示在同一猪场分离的28株cfr阳性肠球菌共有8种不同的PFGE谱型,表明cfr基因在同一猪场中存在克隆传播的现象。Southern杂交结果显示,cfr基因在6株菌中定位于20 kb^50 kb的质粒。本研究为临床制定合理措施控制cfr快速传播提供实验依据。
牟迪王秀梅初胜波刘琪张万江刘思国
关键词：脉冲凝胶电泳最小抑菌浓度SOUTHERN杂交肠球菌
基于鸡毒支原体热休克蛋白DnaK的间接ELISA方法的评价及初步应用被引量：4
2018年
为研究鸡毒支原体(MG)重组热休克蛋白DnaK (rDnaK)的免疫反应原性及其作为ELISA方法中诊断抗原的应用价值,本研究将已构建的含有MG DnaK基因的重组质粒p ET-30a-DnaK进行原核表达纯化,以多份MG的标准阳性血清和阴性血清作为一抗,进行western blot分析,结果显示r DnaK与MG的阳性血清发生特异性反应,与MG的阴性血清无反应条带,表明r DnaK具有较好的免疫反应原性。将其作为包被抗原包被酶标板,用HRP标记的兔抗鸡Ig G作为酶标二抗,分别对抗原包被浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度及工作时间等反应条件进行了优化,建立了一种稳定检测MG抗体的间接ELISA方法。对该方法进行评估,灵敏性试验结果显示该方法与进口试剂盒相当;特异性试验结果显示包被抗原r DnaK不与NDV、IBV、ILTV等几种常见的禽呼吸道疾病的阳性血清发生交叉反应;重复性试验结果显示,批内变异系数为1.6%～5.15%,批间变异系数为2.9%～5.98%;符合率试验结果显示该方法与进口试剂盒的总体符合率为90.4%;抗体持续期试验结果显示该方法最早能在鸡群免疫MG疫苗后一周检测到MG抗体,表明该诊断方法适用于MG感染的早期检测。采用该方法检测了来自全国5个省份的568份临床样品,其结果显示MG的感染率在23%～51%,对我国MG的流行状况做了初步的调查。
王莉莉于艳超周长平赵雅芝潘巧张琳郝文君王秀梅辛九庆
关键词：鸡毒支原体DNAK免疫原性间接ELISA
猪表皮生长因子间接竞争ELISA检测方法的建立被引量：2
2008年
为建立酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测猪血清或尿液中猪表皮生长因子(porcinee pidermal growth factor,pEGF)的含量,以pEGF为包被原,人表皮生长因子(hu-mane pidermal growth factor,hEGF)为竞争抗原,两者与一定量的抗pEGF多抗反应。结果表明,理想的包被抗原浓度为0.625μg/mL,抗pEGF工作浓度为1∶64000,酶标二抗工作浓度为1∶20000,可检测的最适范围为0.4ng/mL^32ng/mL,最低检测限为1ng/mL,批内和批间变异系数分别为3.50%和5.22%。得到回归方程y=-34.53x+76.06(R2=0.993)和标准曲线,从而建立了快速定量测定pEGF含量的酶联免疫吸附试验方法。
张万江王秀梅杨桂香
关键词：猪表皮生长因子多克隆抗体间接竞争ELISA
宠物源大肠杆菌的血清型和毒力基因及耐药性调查被引量：18
2011年
为研究宠物源致病性大肠杆菌(Escherichia coli)的血清型、毒力基因和耐药性之间的相关性,本研究由健康和患病犬、猫直肠拭子样品中分离177株E.coli,并采用玻片凝集法鉴定其血清型,结果显示分离株中定型菌株135株,分别属于20个不同的血清型,其中O1、O2和O8为主要的流行血清型。PCR方法检测11种毒力相关基因,并采用琼脂稀释法测定分离菌株对14种抗菌药的敏感性,结果表明3个血清型的菌株拥有相似的耐药表型,但毒力基因谱不同。62%的分离菌株携带fimH基因,并且毒力基因组合iroN+hlyF、iroN+fimH和traT+sitA比较流行。55%的O1血清型携带fimH基因,并且多数耐受四环素、多西环素、头孢噻吩和庆大霉素;20.8%的O2血清型菌株携带traT和sitA基因;50%的O8血清型携带traT和fimH基因。3个血清型分离菌株多数对安普霉素和阿米卡星敏感。
张美君廖晓萍王秀梅朱恒乾孙坚孙迎王杨庄娜刘雅红
关键词：大肠杆菌血清型毒力基因耐药性
携带cfr基因的猪源大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2序列分析
[目的]获得cfr基因阳性大肠杆菌IncA/C质粒pSCEC2的全核酸序列,并分析cfr基因的遗传背景及新的传播方式.[方法]2010年从猪场分离到1株cfr基因阳性大肠杆菌,通过S1-PFGE、Southern杂交、接...
张万江徐兴然王秀梅刘思国
关键词：多重耐药
一种含有凤尾草和磷霉素的畜禽用复方药物
本发明涉及一种含有凤尾蕨科凤尾草和磷霉素的畜禽用复方药物，由以下重量份的原料组成：磷霉素3‑30份，凤尾草5‑200份。本发明在磷霉素中加入凤尾草后，能够逆转细菌对磷霉素的耐药性，从而提高磷霉素的治疗效果。按常规方法将该...
刘思国王秀梅张万江李兆利
文献传递
多重耐药基因cfr在大肠杆菌中的传播机制研究
葡萄球菌多重耐药基因cfr可以介导5类结构不同药物的耐药且多数定位于质粒上,该基因在人医和兽医临床的广泛传播给临床抗感染治疗带来了严峻的挑战.目前的多数研究都是在革兰氏阳性菌中发现该基因的存在,关于该基因在阴性菌中的流行...
张万江王秀梅刘思国
关键词：大肠杆菌流行病学
文献传递
牛分枝杆菌与鸟型分枝杆菌2型重组蛋白Ag85b的血清学交叉反应研究
2012年
牛分枝杆菌(M.bovis)是引起牛结核病的常见病原,而鸟分枝杆菌(M.avium)2型则通常交叉感染牛,但不会导致严重的病变。为鉴定M.bovis和M.avium的免疫交叉反应情况,本研究分别以M.bovis和M.avium2型的基因组为模板,扩增ag85b基因,分别构建了M.bovis和M.avium的原核和真核表达重组质粒进行表达。以原核表达纯化的两种重组蛋白Ag85b(rAg85b)分别作为包被抗原,交叉检测两种真核重组质粒免疫豚鼠制备的抗血清。结果表明,原核表达的M.bovis和M.avium rAg85b与真核重组质粒免疫豚鼠制备的两种抗血清之间存在较强的免疫交叉反应。研究结果揭示M.bovis和M.avium的Ag85b蛋白存在很强的血清学交叉反应,这将严重干扰M.bovis Ag85b作为候选疫苗的免疫监测。
朱婷王华南刘慧芳于申业王秀梅陈莉苹司微赵海玲刘思国
关键词：牛结核分枝杆菌
减毒沙门氏菌及其应用
本发明公开了减毒沙门氏菌及其应用。本发明应用基因敲除技术，删除掉沙门氏菌(Salmonella pullorum)的体内定植基因和主要毒力基因，获得了双基因缺失的减毒沙门氏菌SM091-DED株，其微生物保藏号是：CGM...
刘思国刘慧芳王秀梅于申业王牟平司薇杨志
广东屠猪肉样品中大肠杆菌耐药性与毒力特征的分析被引量：12
2011年
为分析广东地区屠猪肉中大肠杆菌(E.coli)药物敏感菌株的血清型、毒力基因和系统进化背景,本研究从屠猪肉样品中分离出112株E.coli,采用玻片凝集法鉴定血清型,琼脂稀释法测定10种抗菌药的敏感性,PCR方法检测7种毒力相关基因,多重PCR方法进行系统进化背景判定。结果显示,112株E.coli中,定型菌株95株,分别属于15种血清型,其中O65、O131、O8和O158为优势血清型。几乎所有菌株对氟苯尼考、多西环素和四环素高度耐药,而对头孢曲松高度敏感,其中多重耐药菌株多数耐5种以上药物,常见的多重耐药表型是氟苯尼考/氯霉素/多西环素/四环素/氨苄西林。PCR鉴定结果表明,含有毒力基因的菌株中38%至少具有两个毒力基因,其中EAST1+Stx2e和hlyF+Stx2e比较常见。比较常见的毒力基因为Stx2e和EAST1,STb基因仅在一株菌中检测到。多重PCR鉴定结果显示,屠猪肉样品中E.coli主要分布为共生型的A组和B1组。本研究为大肠杆菌病的控制和合理使用抗生素提供实验依据。
孙迎廖晓萍王秀梅孙坚刘宝涛朱恒乾张悦王杨张美君刘雅红
关键词：大肠杆菌耐药性血清型毒力基因
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