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鲍朗
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- 所属机构:四川大学
- 所在地区:四川省 成都市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
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- 张会东郝牧鲍朗黄毕高蕾
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- 毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin system,简称TA系统)是广泛存在于自然界微生物中的遗传元件,与细菌应激反应或对抗生素产生耐受有关。结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)在人体中形成潜伏感染可能与细菌形成的特殊休眠状态有关,其可逃避宿主免疫系统的监视和清除;TA系统参与了细菌形成休眠体的过程。该系统共有6种类型,其中Ⅱ型TA系统广泛存在于致病性微生物中且数量最多;同时,研究发现Ⅱ型TA系统与微生物致病性密切相关,因而对其研究也较为深入。现就TA系统对结核分枝杆菌的致病力、应激反应以及对抗生素耐受的影响等研究作一概述。
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- 多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL的构建及其功能鉴定被引量:1
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- 目的:构建多耐药临床分离株结核杆菌rpsL基因重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒pMV261/rpsL及其功能鉴定。方法:制备临床分离株多耐药结核杆菌基因组DNA,PCR扩增该株结核杆菌rpsL基因,构建及鉴定该株结核杆菌rpsL基因重组穿梭质粒PMV261/rpsL,重组穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株及其鉴定。结果:成功地构建了重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL;重组大肠杆菌-结核杆菌穿梭质粒PMV261/rpsL电转化结核杆菌H37Rv株获得成功,并且重组质粒PMV261/rpsL电转化后的结核杆菌H37Rv株对链霉素耐药。结论:该临床分离株多耐药结核分支杆菌对链霉素耐药的机制仅仅是由于rpsL基因的93bp、94bp处碱基突变所致,耐药性是一个基因突变的结果,是单基因型。
- 张万江鲍朗邓喜玲吴芳曹旭东王晓樱
- 一种用于结核病预防的新型疫苗
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- 目的观察结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白间的相互作用。方法采用PCR技术克隆结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10基因,构建酵母双杂交载体质粒pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10,经酶切分析和DNA测序证实连接片断的正确性后,采用醋酸锂法顺序转染酵母菌AH109。结果共转染pGBKT7-ESAT-6和pGADT7-CFP-10的酵母菌AH109可以在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp培养基上生长,β-半乳糖苷酶活性实验阳性。结论结核分枝杆菌ESAT-6与CFP-10蛋白可以相互作用。
- 李岩鲍朗张会东王晓樱朱海龙李娅莎
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- 王晓樱鲍朗赵明才张会东龙洋
- 关键词:结核分枝杆菌GST融合表达免疫原性
- 结核杆菌Ag85A/GM-CSF嵌合表达质粒的构建及表达被引量:2
- 2003年
- 目的 探索对结核病DNA疫苗进行基因修饰的新方法。方法 以结核杆菌H3 7Rv 株基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因的成熟肽编码区 ,以经PHA诱导后的小鼠脾组织总RNA为模板 ,通过RT PCR获得小鼠粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子的cDNA ,将二者定向克隆入质粒pBK CMV中构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转染培养的COS7细胞后检测嵌合目的基因的表达。结果 成功构建了小鼠粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子cDNA与结核杆菌Ag85A抗原基因的真核嵌合表达质粒 ,重组质粒能在COS7细胞中进行稳定表达。结论 本研究首次将细胞因子基因与结核杆菌免疫保护性抗原基因嵌合构建嵌合DNA疫苗 。
- 谢勇恩鲍朗张会东陈玮
- 关键词:结核杆菌AG85AGM-CSF结核病基因修饰DNA疫苗
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- 2008年
- 目的研究并比较IL-12联合结核分枝杆菌(TB)DNA(Ag85A和ESAT-6)疫苗初免-BCG加强免疫的应答效果。方法将小鼠随机分成PBS阴性对照组和4组免疫组:BCG组、DNA(Ag85A和ESAT-6)初免-BCG异源加强组、DNA+IL-12初免-BCG异源加强组和DNA初免-BCG+IL-12异源加强组。末次免疫后4、6、8周分别测定血清总IgG水平,同时分离小鼠脾细胞,进行淋巴细胞增殖实验(流式细胞仪检测),测定脾细胞培养上清中IFN-γ分泌水平,并检测小鼠脾脏淋巴细胞表型。结果4组免疫组体外经TB纯蛋白衍生物(TB-PPD)刺激后均检测到特异性IgG抗体产生,且抗体水平在末次免疫后4~8周逐渐增加,4组平均效价为1∶80,1∶120、1∶160、1∶160,各组抗体水平增加无明显差异(P>0.05);小鼠脾细胞体外经TB-PPD刺激后,4组免疫组均能产生特异性淋巴细胞增殖并诱生较强的IFN-γ反应,且DNA+IL-12/BCG和DNA/BCG+IL-12组特异性淋巴细胞增殖活性和IFN-γ分泌水平均明显强于BCG,DNA/BCG组(P<0.05),但DNA+IL-12/BCG和DNA/BCG+IL-12组间差异不明显;4组免疫组小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞较PBS组有较大升高(P<0.05),且DNA+IL-12/BCG和DNA/BCG+IL-12组CD4+、CD8+T淋巴细胞百分比大于BCG以及DNA/BCG组(P<0.05)。结论IL-12联合DNA疫苗初免-BCG加强的免疫策略较BCG免疫以及单纯的DNA疫苗初免-BCG加强免疫能在小鼠体内诱导更强的特异性细胞免疫反应,产生高水平的IFN-γ。
- 高蕾鲍朗郝牧章乐秦紫芳
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- 目的将钩端螺旋体外膜基因ompL1克隆到大肠杆菌-卡介苗(E.coli-BCG)穿梭质粒载体pY6002中,将重组质粒导入BCG并对重组BCG的表达进行初步表达研究。方法采用PCR技术直接从致病性钩端螺旋体(钩体)赖型017株基因组中扩增钩体外膜蛋白基因ompL1,并克隆到E.coli-BCG穿梭质粒载体pY6002中,重组质粒经电转化导入BCG。斑点杂交筛选重组BCG,再通过免疫印迹对其表达进行初步研究。结果在所得6个重组BCG中,有3个表达了ompL1基因产物,其中一个表达较强。结论本研究为发展新一代高效广谱的钩体基因工程疫苗打下了基础。
- 万波鲍朗徐恒徐恒晏菊芳
- 关键词:钩端螺旋体卡介苗聚合酶链反应