搜索到719篇“ T-DNA插入突变“的相关文章
- 基于外源DNA插入突变导致的优势克隆的检测方法
- 本发明公开了基于外源DNA插入突变导致的优势克隆的检测方法，对病毒IS信息数据进行正负链矫正、冗余整合的预处理；步骤2、在预处理完成后，对非特异性扩增造成的IS进行识别，以去除因PCR非特异扩增引起的假阳性IS检测结果；...
- 倪帅孔华磊阚科佳朱凤娇何峰吴宁侯宇宸
- 尖孢镰刀菌T-DNA插入突变库的构建及生长发育相关基因的分析
- 农杆菌介导的遗传转化（Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT）是一个天然的转化工具,基于其较高的转化效率,正被广泛应用于植物与微生物的遗传转化中。尖孢...
- 王成松
- 关键词：尖孢镰刀菌三七根腐病TAIL-PCR侧翼序列
- 尖孢镰刀菌T-DNA插入突变体的筛选及插入基因分析
- 2022年
- 在建立T-DNA插入突变体库的基础上,为筛选出致病力明显下降的突变体并明确其插入位点信息,对突变体的培养表型和致病性差异进行测试,研究结果为进一步阐明尖孢镰刀菌致病分子机制奠定基础。在前期构建的T-DNA插入突变体库中,采用PCR检测筛选了300株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态、生长速率、产孢量、遗传稳定性等生物学性状,用海棠胚根接种法比较突变体致病力差异,对筛选到的致病力明显减弱的突变体进行插入位点侧翼序列分析及Southern杂交分析。结果显示,283个供试突变体都已插入目的基因,并伴有绿色荧光。将T-DNA插入突变体连续转接培养5代后,在含潮霉素B的培养基上能稳定遗传,且菌落形态和颜色无明显改变;在对283株突变体进行致病性测定中,87.9%的突变菌株致病力减弱,在致病力减弱的突变体中,HS2-520、HS2-1016和HS2-2109几乎丧失了致病性。选取8株致病力明显减弱的突变体进行Southern杂交分析,结果显示,其中6株突变体为单拷贝插入菌株,1株为双拷贝插入菌株。对这8株突变体进行了TAIL-PCR侧翼序列扩增,经公司测序,与野生菌株HS2基因组序列比对后获得12条侧翼序列,明确了其中3条侧翼序列为尖孢镰刀菌序列。获得致病力明显减弱的单拷贝插入突变体6株,明确了其中2株突变体的插入位点侧翼序列信息。
- 郭芳睿刘浥杨柯昕褚美荣张全发张雅菲王树桐曹克强
- 关键词：尖孢镰刀菌T-DNA插入突变体SOUTHERN杂交TAIL-PCR致病力
- 香菇T-DNA插入突变体库构建和色氨酸合酶基因功能分析
- 香菇（Lentinulaedodes）是一种重要的人工栽培食用菌，具有较高的营养和药用价值。近年来，我国香菇主产区多次爆发因高温胁迫和后续木霉（Trichodermaspp.）感染引起的菌棒腐烂病，香菇热胁迫应激响应的分...
- 王晨
- 关键词：香菇耐热性突变体库T-DNA插入
- 文献传递
- 利用GFP基因的黄瓜T-DNA插入突变体构建与快速鉴定被引量：5
- 2021年
- 为促进黄瓜功能基因组学研究,本研究开展了黄瓜T-DNA插入突变体快速构建与鉴定方法的研究。基于对黄瓜遗传转化体系农杆菌侵染活力和共培养条件的优化,本研究以绿色荧光蛋白GFP基因为插入片段,进行黄瓜T-DNA插入突变体的创制,并利用荧光显微镜进行快速鉴定,最后采用TAIL-PCR技术对突变体进行分子鉴定,确定突变位点。结果表明,选取农杆菌侵染液在活化至12~18 h时具有最佳的活力和浓度,而最佳共培养温度为23℃。采用体式荧光显微镜快速鉴定,从2 978个转化外植体中鉴定得到3株表达GFP再生苗,转化率为1.00‰。TAIL-PCR成功鉴定了一个突变体,其插入位点位于CsaV31G032940基因的第10个外显子中,该基因在拟南芥中的同源基因为AT4G18950 (blue light-dependent H+-ATPase phosphorylation 1,BHP1),参与蓝光介导的气孔开放过程,但在正常栽培环境中该突变体的T0植株与野生型无差异。本研究结果对黄瓜功能基因组学研究具有重要意义。
- 冯路路王雪艳夏磊王团团李季陈劲枫
- 关键词：黄瓜T-DNA插入GFPTAIL-PCR
- 山茶刺盘孢菌Colletotrichum camelliae T-DNA插入突变体库的构建及致病相关基因的鉴定
- 茶树(Camellia sinensis(L.)O. Kuntze)是我国重要的经济作物之一，炭疽病是茶树上的重要病害，广泛发生于我国各大产茶地区，给茶叶的质量和产量都带来一定的危害。侵染茶树的炭疽菌种类较多，山茶刺盘孢...
- 阿茹娜
- 关键词：炭疽病菌突变体库
- 白桦T-DNA插入突变体的鉴定及突变基因BpCOI1功能研究
- 植物T-DNA插入突变体是遗传学研究中珍贵的实验材料。白桦(Betula platyphylla Suk.)的全基因组测序已经完成,为开展白桦T-DNA插入突变体的研究及后续的基因鉴定提供了可能。本研究以白桦T-DNA插...
- 韩锐
- 关键词：白桦T-DNA插入突变体感病性
- 文献传递
- 尖孢镰刀菌T-DNA插入突变体表型筛选及耐药相关基因功能解析
- 镰刀菌属（Fusarium spp.）广泛存在于土壤和植物中，生态适应性强，能够侵染植物，感染人和动物。镰刀菌侵染植物引起枯萎病和赤霉病，给农业造成巨大经济损失。临床上镰刀菌引起浅表性感染，常见于导致真菌性角膜炎;近些年...
- 邱荔荔
- 关键词：尖孢镰刀菌耐药基因
- 文献传递
- 大豆T-DNA插入突变体侧翼序列鉴定及GmPTIP基因的功能研究
- 我国大豆产量远不能满足人民生活水平的需求，要依靠大规模进口国外转基因大豆,这严重威胁着国家粮食安全。同时由于种质资源的限制，传统育种很难在短期内大幅度提高大豆产量。基因工程技术的诞生和发展为作物遗传改良开辟了新途径。 ...
- 彭刚
- 关键词：大豆遗传育种T-DNA插入突变基因功能
- 油菜黑胫病菌(Leptosphaeria biglobosa)T-DNA插入突变体表型特征分析被引量：2
- 2020年
- 【目的】鉴定油菜黑胫病菌T-DNA随机插入突变体的表型特征。【方法】通过农杆菌介导的遗传转化体系获得黑胫病菌突变体,对这些突变体的生物学特性、致病性、胞外酶进行研究。【结果】大部分突变体的菌落形态与野生型菌株无明显差异;突变体生长速度和产孢量均低于野生型菌株,只有1个突变体产孢量显著高于野生型菌株;所测突变体中53%的突变体与野生型菌株相比,致病性无显著差异;有7个突变体致病性显著升高,突变体和野生型菌株均可分泌蛋白酶和淀粉酶,不分泌果胶酶和纤维素酶。【结论】获得了与野生型菌株表型最为相近的突变体T34,为黑胫病菌与寄主互作机制及其致病机制研究奠定了基础。
- 史志丹宋培玲郝丽芬皇甫海燕燕孟娇杨永青吴晶赵丽丽李子钦
- 关键词：油菜LEPTOSPHAERIA突变体表型
