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一种提高SAM合成酶表达量的方法
本发明提供了一种大规模制备腺苷蛋氨酸合成酶的方法。该方法通过选择性添加二价金属离子和絮凝剂,可使工程菌在发酵液中的SAM表达量提高,同时,可以使发酵液浊度下降从而更利于的进一步提取制备。
熊国裕吉春周德胜
文献传递
SAM合成酶基因的研究进展与应用现状被引量:4
2012年
综述了S-腺苷甲硫氨酸合成酶的结构、性质,在临床应用中的作用以及应用前景等,以期为今后SAMS基因的研究提供重要信息和有价值的参考。
鞠妍侯和胜
关键词:SAM合成酶
一种提高SAM合成酶表达量的方法
本发明提供了一种大规模制备腺苷蛋氨酸合成酶的方法。该方法通过选择性添加二价金属离子和絮凝剂,可使工程菌在发酵液中的SAM表达量提高,同时,可以使发酵液浊度下降从而更利于的进一步提取制备。
熊国裕吉春周德胜
表达融合蛋白的SAM合成酶基因在E.coli BL21体内的克隆
本研究以大肠杆菌为宿主菌,对SAM合成酶基因进行克隆.应用PCR技术从E.coli BL21的总DNA中扩增出1.1kb的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,此基因用于表达融合蛋白,测序证明正确,将其连接到克隆载体PGEMT载体...
黄皓杨忠华王光辉陈俊
关键词:S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因克隆大肠杆菌
文献传递
SAM合成酶基因的克隆及在酿酒酵母中的高效表达被引量:4
2008年
采用PCR技术从S.cerevisiae TCCC31012菌株的染色体DNA中扩增得到S-腺苷甲硫氨酸合成酶-2基因(sam2),将sam2克隆到酿酒酵母表达载体pACT2的强启动子PADH1控制下,以构建高效表达质粒,并在酿酒酵母亮氨酸缺陷型菌株YS58中表达.重组质粒经鉴定含有sam2基因.工程菌YS58-2表达产物经SDS-PAGE,结果显示重组菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的分子质量约为43,ku,经凝胶电泳扫描,表达带约占菌体总蛋白的14%.YS58-2菌株培养72,h的SAM合成酶活力为16.5,U/mg菌体蛋白,较出发菌S.cerevisiae TCCC31012提高了40.3倍,较受体菌YS58提高了32倍.
戚薇铁瑛
关键词:酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶克隆
同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累被引量:21
2008年
利用重组毕赤酵母(Pichia pastoris)强化表达S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl methionine,SAM)合成酶(SAM synthetase,SAMS),发酵生产SAM时,胞内SAMS活性和ATP水平是影响SAM合成的重要因素。为了同时保持较高的SAMS活性和ATP供应,我们构建了一株既含有AOX1诱导型表达单元,又含有GAP组成型表达单元的双SAMS表达单元P.pastoris重组菌株Gd。它既能受甲醇调控表达SAMS,又能以甘油为碳源表达SAMS。在培养过程中,先是以甲醇诱导SAMS表达,得到较高的活,然后在发酵中后期再将碳源换为甘油。这样不但可以维持较高的活,而且可以提高胞内ATP含量。实验结果显示,对于同时利用AOX1和GAP启动子表达SAMS的重组菌,可采取甲醇和甘油两阶段补料,该重组菌的SAMS比产率高于组成型重组菌Xg,Gd进入甘油补料期后胞内ATP含量高于诱导型重组菌Ga。双表达单元菌株Gd的SAM产量达到1.41g/L,比诱导型表达SAMS的重组菌株提高了76.3%,比组成型表达SAMS的重组菌株提高了60.2%,。
吕中原钱江潮储炬郭美锦王永红庄英萍张嗣良
关键词:SAM合成酶PICHIAPASTORIS
共表达sam合成酶和vhb促进重组毕赤酵母合成s-腺苷甲硫氨酸
s-腺苷甲硫氨酸(s-adenosyl-l-methionine,sam)作为所有生物体内的重要中间代谢物,具有良好的临床应用价值。为了获得高效合成sam的重组毕赤酵母,本文构建了aoxl启动子调控的sam合成酶表达载体...
王永强
关键词:SAM合成酶毕赤酵母表达
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利用胞外表达SAM合成酶进行促法合成S-腺苷甲硫氨酸的研究
S-腺苷-L-甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)是甲硫氨酸(methionine, Met)的活性形式,它作为甲基供体参与了多种生化反应,包括转甲基,转氨丙基,转硫作用等,具有广泛和多样的...
王莲哲
关键词:SAM毕赤酵母PPIC9K分泌表达
文献传递
酿酒酵母SAM合成酶基因的克隆及表达
目的:酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达。 方法:以酿酒酵母2B-41的染色体DNA为模板,根据GenBank上已登录的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因设计特异性引物进行PCR扩增,...
安胜欣王雅琴任远
关键词:酿酒酵母S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因表达大肠杆菌
文献传递
有关SAM合成酶的代谢与基因工程研究
S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine ,简称SAM 或AdoMet)是生物体内重要的中间代谢物质,参与多种生化反应,具有广泛和多样的治疗作用。通过微生物的发酵进而提取SAM 是目前SAM 的主...
郭坚
关键词:GAP启动子毕赤酵母

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袁中一
作品数:149被引量:726H指数:16
供职机构:中国科学院上海生命科学研究院
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樊金萍
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研究主题:百合 基因克隆 唐菖蒲 东方百合 植株再生
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研究主题:蛋氨酸合成酶 腺苷 浊度 表达量 SAM合成酶
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研究主题:野生大豆 编码基因 大豆 相关蛋白 基因
李东阳
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