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- 云南野鸟源H9{2}2亚型AIV的遗传进化分析
- 2024年
- 【目的】分析云南纳帕海国际重要湿地H9{2}2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的遗传进化和分子特征,掌握H9{2}2亚型AIV在野禽中的流行特点,为禽流感疫情防控提供数据支持。【方法】采集2022―2023年云南省香格里拉纳帕海国际重要湿地野禽粪样及其周边家禽喉头、泄殖腔和环境水样,经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚分离病毒,结合HA试验和RT-PCR扩增鉴定AIV亚型。利用MBTuni-12/13引物同时扩增H9{2}2亚型AIV毒株的8个基因(HA、{2}A、M、PB2、{2}S、{2}P、PA及PB1)节段,利用二代测序获取全基因组序列,并分析遗传进化关系及关键氨基酸突变位点。【结果】分离到的4株野鸟源H9{2}2亚型AIV的HA、{2}A基因源自Y280-like亚系,M、PB 2基因为G1-like亚系,{2}S、{2}P、PA、PB 1基因为F/98-like亚系,表明4株分离株为多种亚型的重组毒株,重组模式与2013年以后在中国流行的G57基因型一致。序列相似性分析结果显示,4株H9{2}2亚型AIV分离株内部基因与H7{2}9、H5{2}6、H5{2}2等亚型AIV相似性较高,遗传多样性特征突出。HA蛋白裂解位点均符合低致病性禽流感特征,获得了多个可增加跨种感染风险及与哺乳动物致病力增强相关的氨基酸突变位点,包括A198T、Q234L、{2}166D(HA),I292V、A558V(PB2),I368V、L13P(PB1),{2}30D、T215A(M1),以及P42S({2}S1)等。4株野鸟源H9{2}2亚型AIV毒株具有家禽源同亚型毒株特征,野禽源AIV可能源于家禽。【结论】从云南纳帕海国际重要湿地分离到的4株野鸟源H9{2}2亚型AIV可能是由家禽传播的多源重配病毒,属于G57基因型,且具有多个适应哺乳动物宿主相关的氨基酸突变位点。
- 杨佳杨钦鸿王位张永仙代红炀尹红斌李素华
- 关键词：野鸟H9N2亚型禽流感病毒
- H9{2}2亚型AIV {2}P蛋白的原核表达及其免疫效果
- 2024年
- 旨在探讨H9{2}禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)NP蛋白对小鼠的免疫效果,为研制AIV疫苗奠定基础。试验将H9N2{2}病毒NP基因的扩增产物连接到pET-32a表达载体中,构建重组质粒pET-32a-NP,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)细胞,IPTG诱导后,通过SDS-PAGE和Western blot验证蛋白表达,用NP重组蛋白免疫小鼠,测定小鼠血清中IgG抗体和脾细胞培养上清多细胞因子分泌情况评价其免疫效果。结果显示:NP基因编码区序列全长1497 bp,NP重组蛋白以可溶性和不可溶性蛋白两种形式存在,Western blot结果可见特异性条带。免疫小鼠后血清产生IgG结合抗体,抗体效价为1∶40000,与对照组相比,IL-2、IL-5、IL-13分泌量极显著提高(P<0.001),IL-6分泌量显著提高。IL-4和IL-12 p70分泌量与对照组相比升高,却没有显著性差异。而免疫组与对照组相比IL-1β、IL-18、GM-CMF、TNF-α、IFN-γ分泌量被抑制,但差异不显著(P>0.05)。结果表明,NP重组蛋白是一种良好的免疫原,为流感疫苗的深入研究奠定了基础。
- 李小凤谢芝勋阮志华李孟李丹张民秀谢志勤罗思思韦悠谢丽基曾婷婷张艳芳黄娇玲王盛
- 关键词：H9N2亚型禽流感NP蛋白原核表达细胞因子
- 表达H9{2}2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达H9{2}2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MD...
- 高玉龙陈化兰陈运通曾显营刘长军田国彬祁小乐施建忠张艳萍邓国华刘永振包红梅王素艳崔红玉段雨路
- 表达H9{2}2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达H9{2}2亚型AIV HA和IBDV VP2基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含CMV启动子序列、IBDV VP2基因及终止子序列的基因片段CMV‑VP2插入MD...
- 高玉龙陈化兰陈运通曾显营刘长军田国彬祁小乐施建忠张艳萍邓国华刘永振包红梅王素艳崔红玉段雨路
- 表达H9{2}2亚型AIV HA基因的重组I型马立克病病毒株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达H9{2}2亚型AIV HA基因的重组I型马立克病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含SV40启动子、H9{2}2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入MDV基因缺失...
- 高玉龙陈化兰陈运通曾显营刘长军田国彬张艳萍邓国华施建忠包红梅
- 表达H9{2}2亚型AIV HA基因的重组I型马立克病病毒株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达H9{2}2亚型AIV HA基因的重组I型马立克病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用重组克隆技术，将包含SV40启动子、H9{2}2亚型AIV HA基因及终止子序列的基因片段SV40‑HA插入MDV基因缺失...
- 高玉龙陈化兰陈运通曾显营刘长军田国彬张艳萍邓国华施建忠包红梅
- H9{2}2亚型AIV流行株的分离鉴定及抗原性差异的研究
- 王向东
- 中国南方地区H9{2}2亚型AIV遗传进化与抗原性分析及动物发病模型的建立
- H9{2}2亚型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV),已在世界范围内的家禽群中广泛流行,在我国H9{2}2 AIV流行了近30年,因其潜在威胁性不断地困扰着养殖业而受到越来越多的关注。早在1998年我...
- 曾庆航
- 关键词：H9N2亚型AIV遗传进化分析抗原性分析
- 一种H9{2}2亚型AIV MHC B2限制性表位肽及其应用
- 本发明公开了一种H9{2}2亚型AIVMHCB2限制性表位肽及其应用，涉及基因工程技术领域。该表位肽的氨基酸序列如SEQID{2}O.1、SEQID{2}O.2、SEQID{2}O.3或SEQID{2}O.4所示。本发明通过建立H9{2}2亚型...
- 廖明吴顷新代曼曼朱素芳
- H9{2}2亚型AIV多拷贝M2e蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种H9{2}2亚型AIV多拷贝M2e蛋白单克隆抗体，重链和轻链可变区分别具有序列表SEQ.ID.{2}O.1和SEQ.ID.{2}O.2的氨基酸序列。据此，还建立了相关细胞系及其制备方法。本发明杂交瘤细胞株4E10‑A...
- 谢芝勋张民秀李孟罗思思谢丽基李丹阮志华范晴曾婷婷张艳芳黄娇玲王盛李小凤
