搜索到11874篇“ A-549“的相关文章
- LRRC15影响A549细胞自噬的作用研究
- 2024年
- 特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种致病原因不明、进行性、慢性不可逆的间质性肺疾病。为探讨富含亮氨酸重复蛋白15(leucine-rich repeat-containing protein 15,LRRC15)在IPF的作用及调节机制,本研究构建了博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化和A549细胞损伤模型,检测了LRRC15的表达变化。转染siLRRC15后分别采用MTT、GFP-RFP-LC3双荧光标记系统和免疫印迹等方法检测了细胞活性和自噬的变化。结果表明:BLM处理后,小鼠肺组织和A549细胞中LRRC15表达显著上调;将设计和合成的siLRRC15转入A549细胞,LRRC15的表达极显著降低,可以部分恢复BLM引起的细胞损伤;BLM处理A549细胞后,LC3-Ⅱ和P62蛋白呈现上升的趋势;GFP-RFP-LC3双荧光标记检测发现,BLM处理后自噬体数量明显增多;进一步用siLRRC15处理A549细胞后发现,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ、ATG5、ATG7的表达增加,P62蛋白表达下调,自噬流的强度增加。以上研究结果说明LRRC15是IPF中上皮细胞损伤的指示剂,可能通过调节自噬参与纤维化过程中的调节,本研究为进一步阐明IPF的机制提供了必要的理论依据。
- 王棋文贾燕玲李盼余国营
- 关键词：特发性肺纤维化博来霉素A549细胞自噬
- 缺氧对肺癌A549细胞外泌体的影响
- 2024年
- 目的:探讨缺氧对肺癌A549细胞外泌体形态、表型及蛋白表达的影响。方法:对A549细胞进行缺氧培养(实验组)和常氧培养(对照组)后,分别用外泌体提取试剂盒提取外泌体,然后用透射电镜观察其结构形态变化,免疫印迹检测其标记蛋白表达变化,BCA蛋白定量法检测外泌体蛋白量的变化。结果:实验组和对照组A549细胞提取的外泌体直径皆为30~120 nm,呈圆形或椭圆形,有完整胞膜结构,形态规则,内含低密度物质,边缘比较清晰;实验组中A549外泌体的CD9蛋白表达与对照组无明显差异,但是CD81的蛋白表达明显高于对照组。BCA检测结果显示,A549细胞分泌的外泌体蛋白量与接种细胞数呈线性关系,在缺氧状态下A549细胞分泌外泌体的蛋白量明显高于对照组。结论:缺氧导致肺癌细胞A549外泌体CD81的表达增多,细胞分泌外泌体蛋白量增多,提示缺氧状态下的A549细胞具有更强的远处转移能力。
- 张乐郑亚妮王荣华王耿杰洪环谅马良赟
- 关键词：A549细胞外泌体缺氧蛋白表达
- 竹红菌乙素光诱导A549细胞凋亡的机制研究
- 2024年
- 竹红菌乙素(HB)在特定波长照射下可有效杀伤多种癌细胞,但其光诱导细胞死亡的机制尚未完全阐明。为了探索竹红菌乙素(HB)光诱导人肺腺癌细胞A549细胞死亡的机制,本研究运用激光扫描共聚焦显微镜、MTT染色法、流式细胞技术及蛋白质印迹(Western blot)等技术,针对HB在A549中细胞摄取、亚细胞定位、细胞内活性氧的生成、细胞毒性以及细胞死亡机制,进行了详细评估。研究结果显示,HB能够选择性地定位在线粒体,对A549细胞具有较低的暗毒性和较高的光毒性。HB能够光诱导线粒体损伤、线粒体膜电位改变、线粒体内细胞色素c释放和半胱天冬酶的激活,最终引发A549细胞凋亡。由此可见,天然产物HB作为一种靶向线粒体的潜在光敏剂,具有优异的抗肿瘤活性,可通过线粒体介导的内源途径信号通路诱导细胞凋亡。通过该研究,为HB光动力治疗非小细胞肺癌的临床应用提供参考和理论依据。
- 王艳平刘卫敏郑秀丽吴加胜汪鹏飞
- 关键词：竹红菌乙素A549细胞光动力治疗线粒体细胞凋亡
- 右美托咪定通过调控miR-1307表达对肺癌A549细胞生物学行为的影响
- 2024年
- 目的通过检测miR-1307表达水平,分析右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对肺癌A549细胞生物学行为影响的可能机制。方法人肺癌A549细胞接种后培养24h,采用数字表法随机分为4组:肺癌A549细胞组、Dex20μg/ml组、Dex 40μg/ml组及Dex 80μg/ml组;每组每孔设6个平行样,各组细胞培养结束后,通过CCK-8法测定细胞增殖能力,应用Annexin V-FITC/PI双染法观察细胞凋亡,Matrigel膜及Transwell法测定细胞侵袭力及迁移水平,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-1307的表达水平。结果Dex能抑制肺癌A549细胞活力,且作用呈浓度依赖性及时间依赖性;Dex可诱导肺癌A549细胞凋亡,当Dex浓度达到80μg/ml,其凋亡率可升至22.23%;Dex可抑制肺癌A549细胞的迁移与侵袭能力,且呈浓度依赖性。此外,与对照组比较,Dex处理后A549细胞中miR-1307的相对表达量明显下降,且随着Dex浓度的增加下降更为明显。结论Dex能有效抑制肺癌A549细胞的增殖、侵袭、迁移,促进其凋亡,并呈剂量依赖性,其作用可能与其调控miR-1307的表达有关。
- 谢晓梅张静田行瀚于翠翠
- 关键词：肺癌A549细胞生物学行为
- 大麻二酚促进非小细胞肺癌A549细胞凋亡
- 2024年
- 目的为了探讨不同浓度大麻二酚(CBD)对A549非小细胞肺癌的增值抑制和凋亡的相关影响。方法以不同浓度CBD(0、10、20、40μmol/L)作用细胞24h后,采用CCK-8法检测A549细胞的活力;采用克隆形成实验检测细胞的增值能力;应用流式细胞术检测CBD对A549细胞凋亡和活性氧(ROS)含量的影响。构建A549皮下异种移植瘤模型,探讨不同浓度CBD对小鼠皮下肿瘤的影响,采用苏木精-尹红染色法和原位末端转移酶标记技术检测移植瘤组织细胞凋亡。结果体外实验表明,不同浓度CBD均对A549细胞的增值有抑制作用,并且存在剂量依赖性;流式细胞术结果显示,随着CBD药物浓度升高,细胞凋亡数目增多以及ROS含量增高。进一步体内实验结果显示,与对照组相比,实验组皮下移植瘤组织中细胞凋亡增多且对小鼠重要脏器没有药物毒性。结论CBD在体内外均能诱导A549细胞凋亡、抑制其增值,具有潜在抗肺癌细胞的作用。
- 许力叶倩倩
- 关键词：非小细胞肺癌大麻二酚凋亡
- 甘草多糖对LPS诱导的A549细胞炎症损伤的拮抗作用研究
- 2024年
- 甘草是世界上应用最广泛草本植物之一,其中主要提取物甘草多糖是具有多种生物活性的多糖类化合物.旨在探究甘草多糖(Glycyrrhiza polysaccharide)对脂多糖(LPS)诱导的A549细胞炎症的拮抗作用的分子机理,为治疗肺部炎症疾病提供一定理论依据.采用水提醇沉法提取甘草多糖粗提物.利用细胞增殖检测试剂盒CCK-8检测不同浓度甘草多糖以及LPS对A549细胞活力的影响;利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内TNF-α和IL-6因子的表达情况;利用实时荧光定量PCR检测细胞内IL-6、IL-1β、NF-κB的mRNA水平的表达情况.与对照组相比,甘草多糖能够促进A549细胞活力升高,而LPS处理A549细胞后细胞活力显著下降.ELISA法检测结果表示,相比对照组,LPS处理后细胞炎症因子TNF-α和IL-6的含量显著升高,LPS和甘草多糖复合处理后A549细胞内的TNF-α和IL-6因子显著降低.进一步实时荧光定量PCR结果表明,LPS组中细胞IL-6、IL-1β和NF-κB炎症因子mRNA的表达明显升高,甘草多糖处理后细胞中IL-6、IL-1β和NF-κB炎症因子mRNA的表达显著降低.与LPS组相比,甘草多糖能够显著降低炎症因子mRNA的表达.综上所述,甘草多糖对LPS诱导的A549细胞炎症损伤起拮抗作用,其可能机理是通过抑制NF-κB信号通路.
- 苏瑞军杨琳雪唐瑜武晓英
- 关键词：甘草多糖脂多糖A549细胞炎症损伤
- 芹菜素通过AMPK/mTOR通路调控肺癌A549细胞自噬
- 2024年
- 目的 探讨芹菜素(APG)对肺癌A549细胞增殖及自噬的影响及其与AMPK/mTOR通路的关系。方法 体外培养肺癌A549细胞,采用CCK-8法检测不同浓度芹菜素处理A549细胞不同时间后对细胞增殖的影响。后续实验分为空白对照组(0μmol/L APG),低、中、高浓度实验组和抑制剂组5组,采用MDC染色法检测各组对细胞自噬的影响,免疫印迹法检测自噬相关蛋白以及AMPK/mTOR通路相关蛋白表达情况。结果 芹菜素可显著抑制A549细胞增殖,且呈浓度依赖性(P<0.05);20、40、80μmol/L芹菜素组随作用时间延长,对A549细胞的增殖抑制率逐渐增加,呈时间依赖关系(P<0.05)。与空白对照组比较,实验组A549细胞中含高亮点状荧光的自噬小泡数量及IOD值逐渐增加(P<0.05),芹菜素可浓度依赖性上调LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p-AMPKα蛋白表达水平及p-AMPKα/AMPKα比值(P<0.05),下调p-mTOR、p62蛋白表达水平及p-mTOR/mTOR比值(P<0.05)。与高浓度实验组比较,抑制剂组细胞中含高亮点状荧光的自噬小泡减少,IOD值下降,LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p-AMPKα蛋白表达水平及p-AMPKα/AMPKα比值降低,而P62、p-mTOR蛋白表达水平及p-mTOR/mTOR比值升高(P<0.05)。结论 芹菜素能抑制肺癌A549细胞增殖,诱导其自噬,作用机制可能与AMPK/mTOR通路有关。
- 雷轩罗丹卢梁杰高露洋王文军
- 关键词：芹菜素A549细胞自噬肺癌
- LncRNA LUCAT1激活自噬对肺腺癌A549干细胞影响的研究
- 2024年
- 目的探讨LncRNA LUCAT1在肺腺癌A549干细胞(A549/SC)中与细胞自噬调控的关系,及其对A549/SC增殖和迁移的影响。方法通过qRT-PCR检测A549/SC和肺腺癌A549亲本细胞(A549/MN)中LncRNA LUCAT1的表达情况。慢病毒转染构建稳定敲低LncRNA LUCAT1的A549/SC细胞株(sh-LUCAT1)及对照株(NC-sh LUCAT1);CCK8实验、克隆形成实验、Transwell迁移实验检测抑制LUCAT1表达后细胞增殖和迁移的变化。通过蛋白质印迹法检测各转染组细胞中干性和自噬相关蛋白的表达变化。2组样本比较采用独立样本t检验,采用单因素方差分析对组间差异比较结果进行检验。结果无血清悬浮培养法可富集得到A549/SC。与A549/MN相比,A549/SC中干性相关蛋白CD44、Nanog和Bmi-1表达水平均升高,均P<0.05。同时,A549/SC中自噬小体数量明显高于A549/MN(P<0.01),并且A549/SC中自噬相关蛋白Beclin 1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ较A549/MN表达增高,而p62蛋白表达较其亲本细胞偏低,均P<0.05。A549/SC中LUCAT1的mRNA相对表达量明显高于A549/MN(56.04±6.52 vs 1.04±0.38),t=14.600,P<0.001。抑制LUCAT1表达后,A549/SC的增殖、克隆形成及迁移能力均较对照组细胞明显减弱(P<0.01),同时干性相关蛋白CD44(t=3.006,P=0.040)、Nanog(t=6.666,P=0.003)、Bmi-1(t=7.294,P=0.002)和自噬相关蛋白Beclin 1(t=5.460,P=0.005)、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(t=4.748,P=0.009)表达下降,p62蛋白(t=2.929,P=0.043)表达升高,差异均有统计学意义。结论在A549/SC中存在高表达的LncRNA LUCAT1,LUCAT1可激活自噬从而促进A549/SC的增殖和迁移。
- 王鑫姜梅李乐瑶李雷王海伦李亚军
- 关键词：肺癌自噬
- 苦参碱对肺癌细胞A549增殖、凋亡和迁移的作用及机制研究被引量：1
- 2024年
- 目的探讨苦参碱对肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法以不同浓度的苦参碱干预A549细胞,采用CCK-8检测细胞增殖能力变化;Hoechst 33528/PI双染分析细胞凋亡形态变化;划痕实验分析细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western Blot检测Opa1、p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved-caspase-3、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达。结果苦参碱可以降低肺癌细胞A549的增殖活性、提高A549细胞凋亡率。划痕和Transwell实验证实苦参碱可以抑制A549细胞的侵袭转移能力。Western Blot检测发现苦参碱可以提高A549细胞中p53、Bax和Cleaved-caspase-3蛋白的表达,同时可以抑制A549细胞中Opa1、Bcl-2、Caspase-3、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,且随着浓度变化呈量效关系。结论苦参碱具有抑制肺癌细胞增殖和迁移侵袭,增强细胞凋亡的药理作用,其中药理学机制与其对Opa1/p53/Bcl-2/Bax/Caspase-3信号轴、N-cadherin和Vimentin的调控有关。
- 张忠伟林洁莹何良李若欣施如俊凌博
- 关键词：苦参碱肺肿瘤A549细胞
- 芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的影响
- 2024年
- [目的]探讨芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡的影响.[方法]选择人肺腺癌A549细胞株进行体外传代培养,制备成浓度为1.0×105个/mL的细胞悬浮液并接种于96孔板中.实验设空白组(加入DMEM培养液)、对照组(加入DMEM培养液及人肺腺癌A549细胞株)、芝麻素组(芝麻素10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg/mL)、长春瑞滨组(长春瑞滨5、10、15、20、25、30、35μg/mL)及联合用药组(加入IC50浓度的芝麻素和长春瑞滨,IC50为后续联合用药组实验药物浓度).空白组加入160μL的DMEM培养液,对照组及实验组各加入160μL已制备好的人肺腺癌A549细胞株悬浮液,待细胞株贴壁后,空白组、对照组及实验组分别加入20μL的生理盐水和20μL各相关浓度的药物.采用MTT法检测细胞增殖能力,利用倒置显微镜及HE染色法观察细胞形态学变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果]在10~100μg/mL质量浓度范围内,低质量浓度的芝麻素具有抑制A549细胞株增殖的作用,IC50质量浓度为40μg/mL;在5~35μg/mL质量浓度范围内,长春瑞滨具有抑制A549细胞株增殖的作用,且随着药物质量浓度升高细胞抑制率升高,IC50质量浓度为20μg/mL;芝麻素与长春瑞滨联合用药对A549细胞株的抑制率明显高于单药用药(P<0.01).倒置显微镜及HE染色法观察结果显示,与对照组比较,芝麻素(40μg/mL)、长春瑞滨(20μg/mL)及联合用药(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)作用于A549细胞株48 h后贴壁细胞数量均明显减少,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱,部分细胞体积变小、变圆或呈不规则形,核染色质凝集,细胞膜起泡形成凋亡小体,失去原有肿瘤细胞多角形或梭形形态,且联合用药组较单药组上述变化更为明显.流式细胞仪检测结果显示,药物作用48 h后,芝麻素组(40μg/mL)、长春瑞滨组(20μg/mL)及联合用药组(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)细胞凋亡率均明显�
- 金永彪杨哲智姜云峰林星车成日
- 关键词：芝麻素凋亡
