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HPLC法测定赖氨酸维B_(12)颗粒中维生素B_(12)的含量及含量均匀度: 2024年; 目的建立HPLC方法测定赖氨酸维B_(12)颗粒中维生素B_(12)含量及含量均匀度。方法采用高效液相色谱法,紫外检测器,以C_(18)色谱柱为分离柱,以甲醇-0.028 mol·L^(-1)磷酸氢二钠溶液(磷酸调节pH值至3.5)(20∶80)为流动相,在检测波长361 nm处测定维生素B_(12)含量。流速为1.0 mL·min^(-1),进样体积为100μL。结果维生素B_(12)浓度在0.2~5.0μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为105.80%(n=9)。按此方法分析了3个厂家5个批次样品,样品中维生素B_(12)的测定值为标示量的43.8%~93.3%,同时进行了含量均匀度评价试验。结果显示,某些批次样品中的维生素B_(12)存在含量偏低、含量均匀度结果不符合规定的现象,表明厂家的生产工艺可能存在一定的问题。结论本法结果准确可靠,重现性好,可作为赖氨酸维B_(12)颗粒中维生素B_(12)含量及含量均匀度测定方法。; 陈霞飞简淑娟欧阳珠林凤屏; 关键词：含量均匀度

CRISPR/Cas12a技术在动物疫病检测方面的应用: 2024年; CRISPR/Cas系统是由簇状规则间隔的短回文重复序列(CRISPR)和CRISPR相关蛋白(Cas)组成的一种基因编辑技术,可以特异地切割和识别靶标核酸基因。该技术具有检测速度快、灵敏度高和特异性强的优势,因此被广泛应用于动物疫病检测领域。本文就CRISPR/Cas12a结合等温核酸扩增技术和可视化技术在动物疫病检测中的应用进行综述,并对其应用前景进行展望,以期为我国的养殖业和进境动物疫病的监测提供技术支撑。; 孔玉方王慧煜袁向芬许晓琳吴绍强; 关键词：动物疫病试纸条

miR-135a-5p通过调控CXCL12表达降低吗啡耐受: 2024年; 目的研究miR-135a-5p调控CXCL12对C57BL/6J小鼠吗啡耐受的影响。方法将64只小鼠随机分为:对照(NS)组、吗啡耐受(MT)组、CXCL12沉默(CXCL12-siRNA)组、沉默阴性对照(NC-siRNA)组、miR-135a-5p激动剂(miR-agomir)组、激动剂阴性对照(miR-NC)组、miR-135a-5p激动剂+CXCL12过表达(miR-agomir+LV-CXCL12)组、miR-135a-5p激动剂+过表达阴性对照(miR-agomir+LV-control)组。通过皮下注射给药建立吗啡镇痛耐受模型,采用温水甩尾法测定各组小鼠给药前和给药后的热甩尾时间(TL);造模结束后麻醉处死小鼠并取L4~L5脊髓组织,RT-qPCR检测miR-135a-5p及CXCL12 mRNA的表达,Western blot检测CXCL12蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-135a-5p、CXCL12的靶向关系。结果1)成功建立吗啡耐受小鼠模型,与NS组相比,MT组CXCL12 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05),miR-135a-5p显著下调(P<0.05)。2)沉默Cxcl12及过表达miR-135a-5p均提高吗啡耐受小鼠热痛阈值,显著减缓吗啡耐受的发生发展(P<0.05)。3)与miR-NC相比,miR-agomir组CXCL12 mRNA及蛋白表达均下降(P<0.05)。4)双荧光素酶报告基因实验显示miR-135a-5p靶向作用于Cxcl12。5)过表达CXCL12可逆转miR-135a-5p对吗啡耐受小鼠的热痛保护作用。结论miR-135a-5p通过靶向抑制CXCL12表达进而缓解吗啡耐受的形成。; 何华美陆巍; 关键词：吗啡耐受微小RNA

基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路探讨黄芪甲苷对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的保护作用: 2024年; 目的研究黄芪甲苷对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及机制。方法本实验分为正常组、模型组及黄芪甲苷低、中、高(0.4、0.6、0.8μmol/L)剂量组,使用不同浓度黄芪甲苷干预经H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞。使用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针染色检测PC12细胞内活性氧(ROS)含量,赫斯特荧光染色液(Hoechst33258)染色检测PC12细胞相对凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测PC12细胞凋亡相关蛋白及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路关键蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组PC12细胞经H_(2)O_(2)诱导后细胞存活率[(48.53±8.31)%比(100.00±5.61)%,P<0.01]显著下降,细胞内ROS相对含量[(579.77±22.31)%比(100.00±9.76)%,P<0.01]、细胞相对凋亡率[(453.80±49.10)%比(100.00±10.89)%,P<0.01]显著升高,凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相对表达率[(31.87±3.46)%比(100.00±12.38)%,P<0.01]显著下降,半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)[(205.73±9.40)%比(100.00±10.33)%,P<0.01]、Bcl-2相关x蛋白(Bax)[(302.80±19.50)%比(100.00±10.61)%,P<0.01]相对表达率显著升高,磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)[(46.07±3.78)%比(100.00±11.46)%,P<0.01]、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)[(35.70±2.26)%比(100.00±9.66)%,P<0.01]相对表达率显著下降。与模型组比较,经黄芪甲苷干预后的黄芪甲苷中、高剂量组细胞存活率[(65.53±5.30)%、(73.13±6.16)%比(48.53±8.31)%,P<0.05或P<0.01]显著升高,细胞内ROS相对含量[(473.23±40.24)%、(342.27±36.81)%比(579.77±22.31)%,P<0.05或P<0.01]显著下降,细胞相对凋亡率[(366.77±47.65)%、(262.33±48.01)%比(453.80±49.10)%,P<0.05或P<0.01]显著下降,Bcl-2相对表达率[(44.43±6.13)%、(68.57±9.93)%比(31.87±3.46)%,P<0.05或P<0.01]显著升高,Caspase-3[(152.57±7.74)%、(114.40±6.27)%比(205.73±9.40)%,P<0.05或P<0.01]及Bax[(247.67±18.50)%、(182.73±24.14)%比(302.80±19.50)%,P<0.05或P<0.01]相对�; 邓刚周康付建辉; 关键词：脑卒中细胞凋亡黄芪甲苷 PC12

富电子AlnSi12?nN12 (n= 1,2和4)团簇的非线性光学特性研究: 2024年; 本文采用密度泛函理论的B3LYP和CAM-B3LYP方法,详细计算和研究了AlnSi12−nN12 (n = 1,2和4)团簇的线性和非线性光学特征。由第一超极化率的计算结果表明,非对称的体系在外场中容易极化,具有较高的超极化率,因此以SiN为基础的Al掺杂笼状结构在非线性光学材料方面有潜在应用。; 王金霞杨慧慧杨苗燕; 关键词：非线性光学

染色体17q12微缺失和微重复胎儿的产前诊断及妊娠结局: 2024年; 目的探讨染色体17q12微缺失和微重复胎儿的产前超声特点和妊娠结局。方法回顾性收集2018年1月至2022年12月在南京市妇幼保健院行介入性产前诊断经染色体微阵列分析诊断为17q12微缺失的胎儿14例和17q12微重复的胎儿3例。同时检索PubMed、Embase、中国知网、万方数据库及中华医学期刊全文数据库, 检索词为"17q12微缺失""17q12微重复""产前诊断""妊娠结局"及其对应的英文检索词, 检索时间截至2023年2月1日。结合检索到的产前诊断病例(17q12微缺失84例和17q12微重复14例), 分析胎儿的产前超声表现, 并对妊娠结局进行总结。结果本院及检索的病例共98例17q12微缺失胎儿和17例17q12微重复胎儿。(1)17q12微缺失:胎儿产前超声均表现出肾脏异常(100.0%, 98/98), 其中81.6%(80/98)表现出肾脏回声增强;父母溯源提示74.2%(49/66)为新发;64.1%(41/64)终止妊娠, 35.9%(23/64)继续妊娠;对12例活产儿进行随访, 8例存在不同程度的异常, 余4例随访时均无明显异常。(2)17q12微重复:10例胎儿表现为上消化道梗阻;父母溯源提示4/13为新发;14例获知妊娠结局病例中, 9例终止妊娠, 另5例继续妊娠至分娩。对活产儿进行随访发现4例未见异常, 1例活产儿经手术后预后良好。结论 17q12微缺失胎儿常表现为肾脏回声增强, 多为新发变异, 多数预后不良。17q12微重复胎儿常表现为上消化道梗阻, 多遗传自父母。; 周冉王艳孟露露许伊云焦娇李一鸣胡平许争峰; 关键词：产前诊断

PA12/BaSO4改性材料的制备与性能: 2024年; 采用熔融共混法制备了尼龙12(PA12)/BaSO_(4)改性材料,添加多功能偶联增容改性剂YY-503以改善PA12与BaSO_(4)的界面结合力。研究YY-503和BaSO_(4)含量对改性材料的流动性能、力学性能和微观结构影响。结果表明,当YY-503质量分数为0.5%时,随着BaSO_(4)含量的增加,改性材料的熔体流动速率逐步增大,缺口冲击强度逐步降低,拉伸强度和断裂伸长率呈现先增加后降低的趋势;当BaSO_(4)质量分数为10%时,改性材料的拉伸强度和断裂伸长率达到最大值,分别为60.7 MPa和196.3%,比未添加BaSO_(4)时分别提高了9.6%和14.8%。扫描电子显微镜测试结果显示,当BaSO_(4)质量分数为20%时,其从未添加YY-503的PA12基体中大量脱离,而添加质量分数0.5%的YY-503后,BaSO_(4)脱离数量较少,两相结合力良好,说明YY-503的加入产生了良好的偶联增容效应。采用熔融共混制备的PA12/BaSO_(4)改性材料具有良好的性价比,具有广泛的应用前景。; 王庆琳欧阳阅翰蓝佳琳郑皙月潘均安陈晓邦卓志宁林泽铨阳范文; 关键词：尼龙12 硫酸钡改性微观结构

细胞自噬在甲酸致PC12细胞损伤中的作用研究: 2024年; 目的探讨甲酸(FA)染毒对PC12细胞的损伤效应,阐明细胞自噬在其中的关键作用及机制。方法采用CCK-8法检测并确定自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)、自噬溶酶体抑制剂巴弗洛霉素A1(Bafilomycin A1,BA)染毒PC12细胞的浓度。将PC12细胞分为对照组(0 mmol/L)、3-MA组(1.25 mmol/L)、BA组(1 nmol/L)、FA组(16.64mmol/L)、FA+3-MA组(16.64 mmol/L+1.25 mmol/L)、FA+BA组(16.64 mmol/L+1 nmol/L),染毒24 h。采用3-MA、BA调控自噬水平后,用透射电镜观察各组凋亡及自噬情况;采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测PC12细胞自噬情况;采用Western blotting法检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、P62的表达;采用流式细胞仪检测各组PC12细胞的凋亡情况。结果透射电镜观察结果显示,对照组、3-MA组、BA组可见大量的正常线粒体,核膜光滑,染色质均匀;FA组线粒体嵴溶解、断裂、消失,部分存在空泡,自噬现象明显;FA+3-MA组大量线粒体空泡,线粒体呈局灶性,染色质聚集,溶酶体增多,细胞核固缩明显,少见自噬小体形成;FA+BA组大量线粒体空泡,线粒体嵴溶解、断裂甚至消失,染色质边集明显,溶酶体增多,但未形成自噬溶酶体。MDC染色结果显示,对照组、3-MA组、BA组可见极少量的蓝色荧光,FA组、FA+3-MA组、FA+BA组可见大量的蓝色荧光。Western blot检测法结果显示,与对照组相比,FA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达量增加,P62蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);FA+3-MA组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1蛋白表达量与FA组相比明显降低,P62蛋白表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);FA+BA组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、P62蛋白表达量高于FA组,Beclin1蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,BA组、3-MA组的细胞早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率与对照组均无明显差异(P>0.05);FA组3种类型的凋亡率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与FA�; 刘贺荣郝乐乐严姣李亚妮陈楠; 关键词：甲酸 PC12细胞凋亡自噬

桑葚花色苷对PC12细胞氧化损伤的保护作用: 2024年; 通过建立大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)氧化应激损伤模型,探讨桑葚花青素中2个矢车菊素类化合物即矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(cyanidin-3-O-glucoside,C3G)和矢车菊素-3-O-芸香糖苷(cyanidin-3-O-rutinoside,C3R)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的细胞氧化损伤的保护作用及相关作用机制。采用噻唑蓝法检测细胞活力,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量,试剂盒测定细胞中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)以及过氧化氢酶(catalase,CAT)的水平。Western Blot检测抗氧化以及细胞凋亡蛋白的表达水平。结果表明,650μmol/L H_(2)O_(2)处理PC12细胞12 h后,细胞存活率显著降低(P<0.01),50、100μmol/L的C3G、C3R能显著升高细胞活力(P<0.05)及GSH、SOD和CAT等抗氧化酶的活性(P<0.05),降低细胞内ROS以及MDA的含量。此外50、100μmol/L的C3G、C3R处理后显著抑制PC12细胞内c-Jun氨基末端激酶和细胞外调节蛋白激酶蛋白磷酸化水平,抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3以及Bcl-2相关X蛋白等凋亡蛋白的表达(P<0.05),促进核因子E-2-相关因子和血红素加氧酶1抗氧化蛋白的表达水平。综上,C3G、C3R对H_(2)O_(2)所致的PC12细胞氧化损伤具有保护作用,可能与抑制细胞凋亡通路相关蛋白的表达,提高胞内抗氧化酶活性,清除胞内过量ROS,降低细胞凋亡有关。; 朱晓晗铁芳芳欧阳健王洪伦王洪伦; 关键词：PC12细胞氧化应激细胞凋亡

骨形成蛋白7对糖皮质激素诱导PC12细胞凋亡的作用研究: 2024年; 目的探究骨形成蛋白7(BMP-7)对糖皮质激素(GC)诱导PC12细胞凋亡的作用。方法采用不同浓度GC干预PC12细胞,明确不同浓度GC对PC12细胞凋亡的影响;在PC12细胞中感染BMP-7过表达/敲低慢病毒和对照病毒,然后采用DMSO或GC干预细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Bax基因表达,Western blotting法检测Cleaved-Caspase-3蛋白表达。结果不同浓度GC处理后的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与0μmol/L GC比较,GC浓度为10μmol/L时,PC12细胞凋亡率明显升高(P<0.05);GC浓度为50μmol/L时,PC12细胞Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05)。过表达或敲低BMP-7后4组细胞的细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡率、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均降低(P<0.05);与DMSO-NC组比较,GC-oe BMP-7组细胞凋亡水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与DMSO-NC组比较,DMSO-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05);与GC-NC组比较,GC-sh BMP-7组细胞凋水平、Bax基因和Cleaved-Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论高水平GC激素诱导PC12细胞凋亡增加,BMP-7可以拮抗GC诱导的细胞凋亡增加。; 李峰谢方王雪孙兆炜钱令嘉赵云; 关键词：骨形成蛋白7 糖皮质激素 PC12细胞应激

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