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一种诱导鸡胚胎干细胞分化生成原始生殖细胞的方法: 一种诱导鸡胚胎干细胞分化生成原始生殖细胞的方法，属于生物技术领域。其特征是，鸡胚胎干细胞分离培养后，采用诱导培养基，至诱导分化后，收集细胞。本发明提供的方法和诱导培养基可以将鸡胚胎干细胞诱导分化为原始生殖细胞，质量稳定，...; 左其生赵娟娟李碧春丁颖邹艺琛靳锴

鸡胚胎干细胞的分离培养与鉴定: 2020年; 利用胰蛋白酶消化法从X期鸡胚中分离胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs),以鸡胚成纤维细胞为滋养层,进行体外培养,采用形态法和标志分子检测对获得的干细胞进行鉴定。结果显示,获得典型的呈巢状或岛状的鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)克隆,细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色呈蓝紫色,表明具有较高的内源性AKP活性;胚胎阶段特异性表面抗原SSEA-1(stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1)鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。本试验成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。; 李欣于永生吕阳柳俭强金海国朴庆林赵中利; 关键词：胚胎干细胞体外培养碱性磷酸酶

视黄酸诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化的研究: 2020年; 体外胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向生殖细胞分化可用于治疗不育症,同时也为揭示种系世代的分子机制提供最佳模型。试验旨在探讨视黄酸(retinoic acid,RA)诱导鸡胚胎干细胞(chicken embryonic stem cells,cESCs)向雄性生殖细胞(male germ cells,MGCs)分化的作用效果。利用胰蛋白酶消化法从新鲜种蛋X期鸡胚中分离胚胎干细胞,以鸡胚成纤维(chicken embryo fibroblast,CEF)细胞为滋养层,进行体外培养,利用形态法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色和胚胎阶段特异性表面抗原(embryo specific surface antigen 1,SSEA-1)检测对获得的胚胎干细胞进行鉴定。结果表明,获得典型的呈巢状或岛状的cESCs克隆,细胞AKP染色呈蓝紫色,表明其具有较高的内源性AKP活性;SSEA-1鉴定结果呈阳性,显示cESCs克隆具有多能性。采用10-5 mol/L RA诱导鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化,镜下观察细胞形态变化,分别于诱导第0、2、4、6、8、10天提取细胞总RNA,反转录成cDNA,用于实时荧光定量PCR检测生殖细胞标志基因的表达。结果表明,在此诱导过程中,作为胚胎干细胞标志基因Nanog、Sox2表达量持续显著下降,而生殖细胞特异性基因Dazl、Stra8、c-kit、integrinα6表达量呈持续上升趋势;免疫细胞化学检测可观察到特异基因相关蛋白的阳性克隆。本研究成功分离出cESCs,可体外培养并保持未分化状态及多能性。10-5 mol/L RA能够促进cESCs向雄性生殖细胞方向分化,可以引起生殖细胞相应基因的表达,为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供参考。; 李欣赵中利吕阳柳俭强魏天金海国于永生; 关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞性别鉴定诱导分化

一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法: 本发明公开了一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法。本发明提供了鸡胚胎干细胞的体外培养基，为在基础培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、干细胞因子和白血病抑制因子得到的培养基；所述碱性成纤维细胞生长因子、所述干细胞因子和所...; 韩红兵伍椰南张力; 文献传递

一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法: 本发明公开了一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法。本发明提供了鸡胚胎干细胞的体外培养基，为在基础培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、干细胞因子和白血病抑制因子得到的培养基；所述碱性成纤维细胞生长因子、所述干细胞因子和所...; 韩红兵伍椰南张力

gga-miR-302d和gga-miR-1777维持鸡胚胎干细胞多能性的研究: miRNA是一类长度为193 nt的内源性非编码单链RNA分子,可通过降解靶mRNA或阻断靶mRNA的翻译来实现转录后调控作用。鼠或人胚胎干细胞中存在特异性高表达的miRNA,并在维持其多能性的过程中发挥重要调控作用,而...; 冯娜; 关键词：鸡胚胎干细胞多能性; 文献传递

miRNA在鸡胚胎干细胞与鸡胚成纤维细胞表达差异的研究: 为筛选在鸡胚胎干细胞(Chicken Embryonic Stem Cells,cESCs)和鸡胚成纤维细胞(Chicken Embryo Fibroblast Cells,CEFs)中差异表达的MicroRNA(miR...; 冯娜陈胜锋王丙云陈志胜计慧琴; 关键词：鸡胚胎干细胞鸡胚成纤维细胞基因表达

CPED1基因在鸡胚胎干细胞向精原干细胞分化过程中的作用: 精原干细胞(spermatogonial stem cells，SSCs)是动物体内重要的成体干细胞，能够将遗传物质传递给下一代，它既有胚胎干细胞的发育特性又能发育成单倍体生殖细胞。现今有大量研究表明精原干细胞可在体外被...; 王飞; 关键词：细胞分化精原干细胞转录组测序; 文献传递

成纤维生长因子8(FGF8)对鸡胚胎干细胞向精原干细胞分化的研究: 精原干细胞(SSCs)的形成为精子的发生提供了基础.成纤维细胞生长因子家族对SSCs的形成至关重要,FGF8调控SSCs生成的功能需要深入研究. 目的：本试验旨在研究FGF8对鸡胚胎干细胞(ESCs)向精原干细...; 王曼金晶张文慧李婷婷左其生张亚妮李碧春; 关键词：鸡胚胎干细胞精原干细胞细胞分化

性激素促进鸡胚胎干细胞向雄性生殖细胞分化被引量：1: 2016年; 试验分别探讨了睾酮和FSH诱导鸡胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)向雄性生殖细胞分化的作用效果。首先筛选睾酮和卵泡刺激素(FSH)的适宜诱导浓度,在RA和支持细胞的诱导基础上分别添加适宜浓度的睾酮和FSH对传至2代的ESCs进行诱导,通过形态学观察、实时荧光定量PCR及免疫细胞化学对诱导结果进行检测。结果显示:睾酮和FSH的适宜诱导浓度分别为15 ng/m L和25 ng/m L,单独使用睾酮和FSH诱导均未出现类SSCs样细胞;二者联合支持细胞和RA诱导,诱导2 d出现类胚体,随后类胚体体积逐渐变大,诱导12 d类胚体解体出现类SSC样细胞;实时荧光定量PCR结果显示,睾酮和FSH分别与支持细胞和RA共同诱导组中,Stra8表达量持续上调,integrinβ1、Dazl表达量显著上调,ESCs标记基因Nanog、Sox2表达量均呈持续下降趋势;睾酮的多因素诱导组中,Dazl的表达量明显高于RA和支持细胞诱导组;而FSH的多因素诱导组中Stra8的表达量相对于RA和支持细胞诱导组也显著升高。结果表明睾酮和FSH单独诱导不能引起ESCs向雄性生殖细胞分化,但可以促进支持细胞和RA诱导ESCs向雄性生殖细胞分化的作用效果,该结果为进一步研究雄性生殖细胞的形成和调控机制提供理论基础。; 张文慧蒋一秀王颖洁左其生李东连超汤贝贝张亚妮李碧春; 关键词：鸡胚胎干细胞雄性生殖细胞分化睾酮卵泡刺激素

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