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基因组右侧结构基因对禽4型腺病毒体外增殖的影响
禽4型腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)是基因组长度为43-46 kb的线性双链DNA,比人腺病毒的基因组长8-10 kb。属共同基因编码病毒结构蛋白和参与病毒DNA复制,位于基...
刘兴龙
关键词:非结构基因反向遗传系统必需基因重组病毒
文献传递
洲猪瘟病毒结构基因实时荧光LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
本发明提供用于洲猪瘟病毒(ASFV)结构基因实时荧光LAMP检测的引物组、试剂盒及检测方法。该引物组引物组基于结构DNA聚合酶G1211R基因设计,包括:FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物。检测结果出现典型...
林志雄田纯见杨舒展段喻燕刘志玲罗琼陈茹
文献传递
洲猪瘟病毒结构基因实时荧光LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法
本发明提供用于洲猪瘟病毒(ASFV)结构基因实时荧光LAMP检测的引物组、试剂盒及检测方法。该引物组引物组基于结构DNA聚合酶G1211R基因设计,包括:FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物。检测结果出现典型...
林志雄田纯见杨舒展段喻燕刘志玲罗琼陈茹
洲猪瘟病毒结构基因实时荧光LAMP检测方法的建立被引量:14
2017年
为建立洲猪瘟病毒(ASFV)通用型高通量检测技术,利用高度保守的结构DNA聚合酶G1211R基因,制备质粒标准品,建立实时荧光LAMP方法,出现典型的S形核酸扩增曲线,扩增产物具有特异的熔解曲线。G1211R基因质粒标准品在1.81×10~5拷贝数/μL^1.81×10~9拷贝数/μL对数值与Ct值之间的线性关系良好。以ASFV E70株病毒核酸为模板,LAMP检测灵敏度达到21pg,优于荧光定量PCR方法。重复性试验LAMP检测批内和批间变异系数均小于5%。LAMP方法检测ASFV特异性良好,与猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及昆虫核酸无交叉反应。以ASFV Arm 07株制备各种临床模拟样品,检出阳性率达到17.31%。检测方法的建立,可为洲猪瘟防控提供新的技术手段,有利于不同基因型毒株检测和出入境快速筛查。
田纯见杨舒展段喻燕刘志玲林志雄罗琼陈茹
关键词:非洲猪瘟病毒DNA聚合酶
犬博卡病毒结构基因NP1多克隆抗体的制备与鉴定被引量:2
2015年
目的:制备犬博卡病毒(MVC)的结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定。方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖(IPTG)诱导下,表达谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NP1蛋白。用亲和层析纯化的融合蛋白免疫大白兔,制备NP1抗血清并用ELISA法测定抗血清效价。采用Western blotting和免疫荧光法检测NP1抗血清的特性。结果:成功构建MVC NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物经亲和层析纯化后得到高纯度的NP1融合蛋白,以其免疫大白兔获得NP1多抗血清,ELISA法检测效价达到1∶400 000。Western blotting法及免疫荧光检测,所得抗血清具有较高的效价及特异性。结论:本研究利用原核表达的MVC GST-NP1融合蛋白制备的NP1抗血清效价高、特异性高,为进一步深入研究NP1在MVC感染及致病分子机制中的作用奠定了基础。
闫琰张茜马婧李建宁张薇孙玉宁
关键词:多克隆抗体
基于核心基因结构基因5B序列的丙型肝炎病毒基因分型法与线性探针技术对广东地区慢性丙型肝炎患者基因分型的比较被引量:2
2012年
目的利用核心基因(core)、结构基因5B(NS5B)序列与线性探针技术(LiPA)研究广东地区慢性丙型肝炎患者HCV的基因型分布,探讨LiPA基因分型的准确性。方法分别采用core和NS5B片段序列和INNO—LiPA2.0对广东地区nO例慢性丙型肝炎患者进行基因分型。使用SPSS10.0统计软件对数据进行分析,两样本间的比较采用7。检验。结果110份HCV样本中有97份扩增到core区段序列,62份扩增到NS5B区段序列,同时扩增到core、NS5B序列的样本有57份。core与NS5B序列的分型结果一致,102份标本被分为1b、2a、3a、3b、6a5个亚型,分别占61.8%、9.8%、3.9%、3.9%和20.6%。在基因型水平,除6型外,其他基因型均能通过INN(3-LiPA2.0正确分型;在亚型水平,除1b和3b型,其他亚型未能被准确区分,其中81.5%的6a型被错分为1b型。结论6a型已成为广东地区慢性丙型肝炎患者中第二大基因型,LiPA技术是否能准确区分6a型与1b型,有待进一步研究。
蔡庆贤洪春霞张晓红高志良
关键词:肝炎病毒属肝炎丙型慢性基因病毒核酸探针
家蚕细小病毒样病毒结构基因1/2启动子的活性研究
家蚕细小病毒样病毒(Bombyx mori Parvo-likevirus,BmPLN)原称为家蚕浓核病毒Ⅱ型(Bombyx mori DensovirustypeⅡ,.mDNV-Ⅱ),是首例动物二分病毒。它是引起家蚕浓...
朱守林
关键词:非结构基因启动子活性昆虫细胞
文献传递
HCV结构基因5B区RNA检测及临床应用
文献传递网络资源链接
HCV结构基因5b区RNA检测及临床应用
HCV感染的检测主要依靠抗—HCV和HCV RNA两类检测系统。由于HCV在感染者血中浓度极低,一般方法很难测到。直到1990年Weiner等首次将逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)用于HCV的检测以来,该技术不断革新...
许青田朱顺强丁丽敏许柯梁彦玲
文献传递
人细小病毒B19结构基因ns1和7.5ku蛋白基因的克隆与表达
2010年
目的通过分子克隆技术,构建人细小病毒B19结构基因ns1和7.5kugene的原核表达载体,并诱导重组NS1和7.5ku融合蛋白的表达,为蛋白的纯化奠定基础。方法以含有B19病毒全基因组感染性克隆为模板,用PCR法扩增目的基因ns1和7.5kugene,以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,转化E.coliBL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养6h后,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,IPTG诱导能获得较高的目的蛋白。结论人细小病毒B19的结构基因能在大肠埃希菌中获得成功的表达,为蛋白的纯化和抗体制备奠定基础。
董衍明冯志鸿王也张楠王媛徐鹏李毅
关键词:人细小病毒B19NS1

相关作者

陶其敏
作品数:194被引量:829H指数:15
供职机构:北京大学人民医院
研究主题:丙型肝炎病毒 丙型肝炎 聚合酶链反应 HCV RNA
萧树东
作品数:613被引量:8,508H指数:41
供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院
研究主题:幽门螺杆菌 胃癌 幽门螺杆菌感染 胃肿瘤 根除幽门螺杆菌
魏来
作品数:584被引量:8,304H指数:37
供职机构:新疆医科大学第一附属医院
研究主题:丙型肝炎病毒 丙型肝炎 乙型肝炎病毒 慢性丙型肝炎 基因型
杨有文
作品数:7被引量:5H指数:1
供职机构:首都医科大学基础医学院神经科学研究所
研究主题:非结构基因 转基因小鼠 MRNA差异显示 黑质 帕金森病
丛笑倩
作品数:41被引量:283H指数:11
供职机构:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
研究主题:胚胎干细胞 小鼠胚胎干细胞 细胞分化 小鼠 胚胎