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限制性核酸内切酶
一种限制性核酸内切酶,其可以识别双链DNA下列化学结构式1的核苷酸序列,并在箭头所示位点上严格裂解上述核苷酸序列。核酸内切酶可通过培养能产生它的链霉菌属的菌株(FERMBP-5022)来制备。;(化学结构式1)
野村佳子石野良纯加藤郁之进
文献传递
限制性核酸内切酶
1995年
本文综述了限制性核酸内切酶的种类、质、制备方法、活力和纯度测定方法及其在分子生物学方面的应用。
宋丽莉
关键词:限制性核酸内切酶分子生物学工具酶酶活力纯度测定
一种基于限制性核酸内切酶编码和多重滚环扩增对布鲁氏菌病病原鉴别的试剂盒
本发明公开一种基于限制性核酸内切酶编码和多重滚环扩增对布鲁氏菌病病原鉴别的试剂盒,属于病原菌检测技术领域。本发明设计用于检测牛种、羊种、猪种布鲁氏菌,牛种布鲁氏菌野毒株2308和疫苗株A19的靶标序列、RE编码锁式探针、...
魏华孙可
基于限制性核酸内切酶的通用型探针以及其应用
本发明提供了基于限制性核酸内切酶的通用型探针以及其应用,所述通用型探针为由茎结构域和位于茎结构域两端的环结构域组成的双发卡结构;茎结构域包含反向互补的上链和下链,上链中包含限制性核酸内切酶位点区域,下链包含自我结合...
祁军潘娟刘寅万里
一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法
本发明公开了一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法。本发明的一种非限制性核酸内切酶突变体,在野生型非限制性核酸内切酶氨酸酸序列上进行六个氨基酸位点的突变获得,六个氨基酸突变位点为:R65V、N66A、W67F、E135...
杨洋汪寄宇
一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法
本发明公开了一种非限制性核酸内切酶突变体及其制备方法。本发明的一种非限制性核酸内切酶突变体,在野生型非限制性核酸内切酶氨酸酸序列上进行六个氨基酸位点的突变获得,六个氨基酸突变位点为:R65V、N66A、W67F、E135...
杨洋 汪寄宇
反应后快速去除限制性核酸内切酶的方法
本发明涉及反应后快速去除限制性核酸内切酶的方法,该方法包括:制备偶联有限制性的磁珠;将偶联有限制性的磁珠与底物DNA反应完成后,通过磁吸可快速去除。本申请方法不需要后续失活或者柱提取的步骤,回收的限...
肖晓文曹文刚崔银芳喻春函
一种常温限制性核酸内切酶突变蛋白及其制备方法与应用
本发明公开了一种低温限制性核酸内切酶突变蛋白及其制备方法与应用,本发明通过广泛而深入的研究,通过对蛋白进行氨基酸单位点突变,首次获得了对于KmAgo的活具有显著改善的突变体蛋白,是基于kurthia massilie...
郑力荣路红芳吴邦昊徐恒洪亮
限制性核酸内切酶Asc I蛋白质的表达纯化、活测定及小角散射结构解析
2023年
限制-修饰系统(RMS)是细菌为了防御外来DNA入侵而进化产生的一种保护机制。RMS系统可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型。Asc I是一种Ⅱ型限制性核酸内切酶,能识别8-bp DNA基序。尽管Asc I已经被广泛应用于分子克隆研究中,然而目前尚无关于Asc I蛋白质的表达、纯化以及结构机制等方面的研究报道。本研究基于大肠杆菌重组表达体系建立了Asc I重组蛋白质的高效表达和纯化方法,从每升细菌培养物中可获得约2.5 mg纯度大于95%的Asc I蛋白质。进一步的质研究表明,Asc I反应的最适温度是37℃,最适pH为7.5~8.5,反应依赖于Mg^(2+)和Mn^(2+)等二价金属离子。基于小角X射线散射(SAXS)分析技术,我们还建立了Asc I蛋白质及其与底物DNA复合物在溶液状态下的三维空间模型,并结合点突变对该模型进行了验证。总之,本研究对Asc I蛋白质的重组表达、纯化、质以及结构机制进行了比较系统地研究,为了解RMS系统的工作机制提供了结构基础,同时也为Asc I作为分子克隆工具的进一步开发和改造提供了理论依据。
方倩倩陈浩廖馨源林忠辉
关键词:限制性核酸内切酶表达纯化小角散射
基于限制性核酸内切酶的通用型探针以及其应用
本发明提供了基于限制性核酸内切酶的通用型探针以及其应用,所述通用型探针为由茎结构域和位于茎结构域两端的环结构域组成的双发卡结构;茎结构域包含反向互补的上链和下链,上链中包含限制性核酸内切酶位点区域,下链包含自我结合...
祁军潘娟刘寅万里
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邹国林
作品数:234被引量:1,789H指数:22
供职机构:武汉大学生命科学学院
研究主题:超氧化物歧化酶 纯化 DNA 挥发油 模拟酶
何震宇
作品数:25被引量:11H指数:2
供职机构:广东药科大学
研究主题:试剂盒 多态位点 基因型 限制性核酸内切酶 酶切图谱
卢运海
作品数:14被引量:26H指数:3
供职机构:福建农林大学
研究主题:甘蔗 甘蔗品种 褐锈病 基因位点 限制性核酸内切酶
王恒波
作品数:83被引量:171H指数:7
供职机构:福建农林大学
研究主题:甘蔗 转基因甘蔗 基因组 引物 实时荧光定量PCR
陈平华
作品数:90被引量:197H指数:9
供职机构:福建农林大学
研究主题:甘蔗 转基因甘蔗 甘蔗愈伤组织 基因枪轰击 基因组