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采用实时荧光 定量PCR 法 检测大曲中的3种高温放线菌 2024年 荧光 定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR ,RT-qPCR )方法 对大曲中3种高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris、T.intermedius和T.daqus)进行特异性定量 检测。根据T.vulgaris、T.intermedius、T.daqus全基因组中特异性单拷贝核心基因recA、mdH、gyrA为参考序列分别设计了一对可扩增278、233、291 bp片段的引物;经特异性、有效性、准确性实验显示,在常见的13种白酒酿造微生物中,引物TV、TI、TD分别可特异性检测T.vulgaris、T.intermedius、T.daqus,检测范围为2.82~8.82 lg copies/μL,加标回收率95%~105%。进一步对大曲发酵过程样品检测,结果显示,T.vulgaris含量在呈现波动趋势,在第5天达到最高,为(6.06±0.02)lg copies/g;T.intermedius含量呈现先上升后下降的趋势,在第7天达到最高,为(6.33±0.13)lg copies/g;T.daqus含量在0~12 d呈现波动趋势,在12~14 d下降,随后一直上升,发酵结束时含量最高,为(7.62±0.02)lg copies/g。该研究建立的RT-qPCR 方法 可对大曲发酵过程中3种高温放线菌进行特异性鉴定和快速定量 ,为进一步监测高温放线菌在白酒酿造过程中的功能提供了方法 。关键词：大曲 高温放线菌 特异性引物 实时荧光定量PCR 胶体金法 与实时荧光 定量PCR 法 检测甲乙型流感病毒的应用价值 2024年 法 与实时荧光 定量 聚合酶链反应(PCR )法 检测甲乙型流感病毒的应用价值。方法 选取2023年1月至2023年12月我中心进行检测的80例流感患者,均行胶体金法 和PCR 法 检测,比较两种方法 检查所用时间和检查结果。以综合检查结果为金标准,分析两种方法 与金标准结果的一致性。结果 胶体金法 检查所用时间(15.46±3.82)min短于PCR 法 (180.28±32.09)min,差异有统计学意义(P<0.05)。80例流感患者经综合检查发现甲型44例、乙型36例;胶体金法 检出甲型42例、乙型31例,检出率为91.25%;PCR 法 检出甲型43例、乙型34例,检出率为96.25%。两种方法 诊断效能对比,差异无统计学意义(P>0.05)。胶体金法 、PCR 法 检查结果与金标准结果一致性均极好(Kappa=0.891、0.938,P<0.05)。结论 胶体金法 、PCR 法 鉴别诊断甲、乙型流感病毒的准确度、灵敏度及特异度均较高,与临床综合检查结果一致性均较好,胶体金法 检查所用时间更短,临床应用时可灵活选择检测方法 ,为临床鉴别诊断提供便利。关键词：胶体金法 实时荧光定量PCR法 乙肝肝炎病毒检测中荧光 定量PCR 法 与时间分辨免疫荧光 的对比分析 2024年 荧光 定量PCR 法 与时间分辨免疫荧光 在乙肝肝炎病毒检测中的应用效果。方法 选用96例疑似乙肝患者,均进行荧光 定量PCR 法 与时间分辨免疫荧光 病毒检测,以细菌培养作为金标准,比较不同检测手段的阳性检出率、检验结果及检测效能。结果 荧光 定量PCR 法 的检测符合率、灵敏度,高于时间分辨免疫荧光 法 ,而特异度低于时间分辨免疫荧光 法 。结论 荧光 定量PCR 法 和时间分辨免疫荧光 两种方法 各有优缺点,适用于不同的检测环境和需求。在实际应用中,需要根据检测要求和实际情况进行选择,确保有效性和准确性。关键词：时间分辨免疫荧光 胶体硒法 HIV快速检测与实时荧光 定量PCR 法 检验的一致性研究 2024年 法 人类免疫缺陷病毒(HIV)快速检测与实时荧光 定量PCR 法 检验的一致性。方法 :选取2020年1月—2021年1月到艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊就诊的987例患者为研究对象,均接受胶体硒法 、实时荧光 定量PCR 法 检验,以免疫印迹法 为金标准,比较不同检测方式的诊断效能、不同检测方式之间检验的一致性,对比不同方式对“窗口期”弱阳性抗体检测情况及不同检测方式的一致性。结果:987例疑似HIV高感染风险患者中,经免疫印迹法 检测发现,373例阳性,614例为阴性;胶体硒法 与实时荧光 定量PCR 法 比较无统计学差异(P>0.05)。胶体硒法 诊断结果与免疫印迹法 诊断结果之间具有一致性(Kappa值=0.539),等级为中度;实时荧光 定量PCR 法 与免疫印迹法 诊断结果之间具有一致性(Kappa值=0.872),等级为高度;经免疫印迹法 检测45份“窗口期”弱阳性抗体实时荧光 定量PCR 法 检测43例阳性,胶体硒法 检测42例阳性,实时荧光 定量PCR 法 的灵敏度、准确度均显著高于胶体硒法 (P<0.05)。胶体硒法 与实时荧光 定量PCR 法 胶在“窗口期”弱阳性抗体诊断结果中的一致性较差(Kappa值=0.357)。结论:胶体硒法 与实时荧光 定量PCR 法 对HIV检测的效果具有一致性,实时荧光 定量PCR 法 准确性略高;胶体硒法 与实时荧光 定量PCR 法 在“窗口期”弱阳性抗体诊断结果中的一致性较差,实时荧光 定量PCR 法 在“窗口期”弱阳性抗体血清检测中具有较高的检测价值。关键词：胶体硒法 艾滋病 HIV病毒 窗口期 实时荧光定量PCR法 实时荧光 定量PCR 法 在食源性致病菌检测中的应用效果 2024年 荧光 定量PCR 法 在食源性致病菌检测中的临床应用效果。方法 选取2021年1月至2023年11月医院送检的300例食源性腹泻患者的粪便样本,以传统分离培养法 为金标准,均采用实时荧光 定量PCR 技术检测所有样本的致病菌情况,比较阳性率,评价实时荧光 定量PCR 法 的灵敏度和特异度。结果实时荧光 定量PCR 法 对食源性腹泻患者粪便样本中沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌的检出率高于分离培养法 (P<0.05),实时荧光 定量PCR 法 检测沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌具有特异性,可达到10-8cfu/ml的检测水平。结论实时荧光 定量PCR 法 的检出率、灵敏度高,可达到10-8cfu/ml的检测水平,具有特异性,在食源性疾病致病菌的检测中具有应用价值。关键词：实时荧光定量PCR 沙门菌 志贺菌 金黄色葡萄球菌 细菌培养法 、免疫层析法 及实时荧光 定量PCR 法 在孕晚期B族链球菌筛查中的应用对比研究 2024年 法 、免疫层析法 及实时荧光 定量PCR 法 在孕晚期B族链球菌(Group B Streptococcus,GBS)筛查中的应用价值。方法 :选取2021年3月至2023年5月在我院接受产检的孕晚期孕妇154例。以病理活检为金标准,分析GBS筛查结果;对比细菌培养法 、免疫层析法 及实时荧光 定量PCR 法 单独及联合诊断孕晚期GBS的效能;分析细菌培养法 、免疫层析法 及实时荧光 定量PCR 法 单独及联合筛查与病理筛查结果的一致性。结果:154例孕晚期孕妇中,经病理活检检出39例孕妇GBS为阳性;三者联合诊断GBS的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值以及阴性预测值均高于细菌培养法 、免疫层析法 与实时荧光 定量PCR 法 单独检测(P<0.05);三者联合检测与病理结果的Kappa值为0.936,均高于细菌培养法 、免疫层析法 、实时荧光 定量PCR 法 单独检测。结论:在筛查孕晚期孕妇GBS中,实时荧光 定量PCR 法 联合细菌培养法 、免疫层析法 诊断效能高于单独检测,可通过三者联合检测为早期诊断孕妇是否感染GBS提供依据。关键词：细菌培养 免疫层析 孕晚期 B族链球菌 传统方法 、荧光 定量PCR 法 、LAMP法 检测痰液标本中肺炎链球菌的价值 2024年 法 、荧光 定量 聚合酶链反应(PCR )法 、环介导恒温扩增技术(LAMP)法 检测痰液标本中肺炎链球菌的价值。方法 :选取2022年1月—2023年7月医院收治的100例肺炎患者,均按相同方法 严格采集患者的痰液标本后,采用痰培养法 、荧光 定量PCR 法 、LAMP法 检测肺炎链球菌,分析不同检测方法 的检测价值。结果:100例肺炎患者痰液标本经痰细菌培养法 、荧光 定量PCR 法 、LAPM法 检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),与痰细菌培养法 相比,荧光 定量PCR 法 、LAPM法 对肺炎链球菌检测一致性高(Kappa=0.826、0.830,P<0.05)。以痰细菌培养法 作为金标准,荧光 定量PCR 法 、LAPM法 对肺炎链球菌检测价值比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:传统方法 、荧光 定量PCR 法 、LAMP法 检测痰液标本中肺炎链球菌均有较高价值。关键词：荧光定量PCR法 LAMP法 肺炎链球菌 荧光 定量PCR 法 与培养法 检测解脲支原体结果比对分析2024年 荧光 定量PCR 法 (qPCR )和培养法 在解脲支原体(UU)检测中的符合率,为临床解脲支原体检测方法 的选择提供参考依据。方法 收集近期就诊于该院112例患者的生殖道分泌物标本,分别采用qPCR 法 与培养法 检测UU。结果在112例标本中,UU培养法 阳性53例,阳性率为47.32%,qPCR 法 阳性61例,阳性率54.46%(χ2=1.143,P=0.285>0.05)。61例qPCR 法 阳性的UU浓度范围1.60×10^(3)-1.04×10^(7)copy/mL,其中10^(3)copy/mL 12例(19.7%),10^(4)copy/mL 15例(24.6%),10^(5)copy/mL 22例(36.1%),10^(6)copy/mL 9例(14.7%),10^(7)copy/mL 3例(4.9%)。培养法 阴性而qPCR 法 阳性病例9例,qPCR 法 测定浓度范围10^(3)~10^(5)copy/mL。结论qPCR 法 检测UU的阳性率略高于培养法 ,两种方法 不符合结果的UU测定浓度分布在10^(3)-10^(5)copy/mL之间。关键词：荧光定量PCR法 解脲支原体 抗酸染色和实时荧光 定量PCR 法 检测石蜡组织切片结核分枝杆菌的对比分析 2024年 法 进行准确性和临床应用价值评估。方法 采用抗酸染色和实时荧光 定量 聚合酶链反应(RT-qPCR )两种方法 检测甲醛固定石蜡包埋切片中的结核分枝杆菌,评估两种方法 的准确性。结果142例病理标本中抗酸染色法 阳性17例,阳性率为11.97%,RT-PCR 法 阳性35例,阳性率为24.65%,差异有统计学意义(P<0.05),RT-qPCR 法 阳性率高于抗酸染色法 。结论检测FFPE中结核分枝杆菌的两种方法 都有各自的局限性,需综合评价后选择合适的方法 进行检测才能准确有效地提高结核病诊断。关键词：结核分枝杆菌 抗酸染色 实时荧光定量聚合酶链反应 结核杆菌检验中涂片抗酸染色法 与荧光 定量PCR 法 的价值对比 2024年 法 与荧光 定量 聚合酶链式反应(PCR )法 在检验结核杆菌中的价值,为肺结核诊断提供依据。方法 选取2021年8月至2023年8月本中心就诊的60例疑似肺结核患者,采集患者痰液标本,分别采用荧光 定量PCR 法 、涂片抗酸染色法 对其进行检测,并将痰培养所得结果作为本研究的“金标准”,就两种检测方法 的具体诊断效能(特异度、准确度与灵敏度、阳性预测值、阴性预测值)进行对比。结果在疑似肺结核患者60例当中,通过痰培养确诊肺结核患者38例,所占比重为63.33%;荧光 定量PCR 法 诊断阳性36例,涂片抗酸染色法 为34例。荧光 定量PCR 法 检测的特异度(95.45%)、准确度(93.33%)、灵敏度(92.11%)、阳性预测值(97.22%)、阴性预测值(87.50%)均较涂片抗酸染色法 (68.18%、70.00%、71.05%、79.41%、57.69%)高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用荧光 定量PCR 法 对结核杆菌进行检测,其在诊断肺结核方面的效能,优于涂片抗酸染色法 ,更具适用性。关键词：结核杆菌 肺结核 脱氧核糖核酸 荧光定量PCR法
