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基于RT-RAA的禽流感H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法的建立被引量：1: 2023年; 采用逆转录-重组酶介导等温核酸扩增技术(RT-RAA)和成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)检测系统,建立一种快速、高灵敏度和高特异性的禽流感病毒(AIV)H5亚型核酸检测新方法。通过分析342条禽流感病毒H5亚型的HA基因序列,选取保守性区域设计具有强特异性的CRISPR RNA(crRNA)序列以及RT-RAA引物,并对检测体系中的主要成分LwaCas13a蛋白、crRNA、TaqMan探针、T7 RNA Polymerase、NTP Buffer Mix含量进行优化,建立了基于RT-RAA的AIV H5亚型核酸CRISPR-Cas13a检测方法。取105~1 copies·μL^(-1)含有目的基因的质粒标准品和其他亚型禽流感病毒以及其他禽病病毒分别验证和评价该方法的灵敏性和特异性。结果表明,本文设计的RT-RAA引物与crRNA特异且灵敏,其最佳反应体系中主要成分用量分别为LwaCas13a蛋白(60μg·mL^(-1))2.0μL、crRNA(100μmol·L^(-1))3.2μL、TaqMan探针(50μmol·L^(-1))1.28μL、T7 RNA Polymerase 0.25μL、NTP Buffer Mix 2.0μL。该方法检测灵敏度可达1 copy·μL^(-1),且与AIV H3、H6、H7、H9、H10亚型以及NDV、IBV、IBDV、DTMUV无交叉反应。对56份已知的临床样品进行检测,检测结果与荧光定量RT-PCR符合率为98.2%。综上,本研究通过RT-RAA等温扩增技术结合CRISPR-Cas13a基因编辑技术建立了针对AIV H5亚型的快速检测平台,该方法从样本的核酸抽提到获得检测结果的时间控制在1 h 20 min以内,为AIV H5亚型高灵敏度和高特异性的临床快速检测提供了新的技术手段,具有良好的应用前景。; 杨芷翊王新凯史玉婷付思源张钰炘曹琛福贾伟新; 关键词：H5亚型禽流感病毒 CRISPR 核酸检测

同时预防禽流感H5和H9亚型的腺病毒载体二价苗及其制备方法: 本发明提供了一种同时预防禽流感H5和H9亚型的腺病毒载体二价苗及其制备方法。本发明采用禽流感H5亚型和H9亚型的血凝素抗原为核心抗原，合成融合基因H5H9HA，并采用腺病毒作为载体，把融合基因H5H9HA克隆到腺病毒穿梭...; 王增利周立桥张哲李金华霍惠玲韩荞忆胡晓悦马贵达顾文源马宏伟韩庆安刘天驹仇国明甄理段英萍

2019-2022年江苏省高致病性禽流感H5和H7免疫抗体监测与分析: 2023年; 高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属引起的家禽烈性传染病,是国家强制免疫的动物传染病,发病率高、病死率高,用禽流感疫苗对家禽进行免疫预防是防控该病的有效措施。近年来,江苏省养禽业发展迅速,年出栏家禽达10.5亿只左右,主要分布60个主要养禽县区。为了解江苏省高致病性禽流感免疫抗体情况,评估免疫效果,分别于2019—2022年每年春季(5月)和秋季(10月)对江苏省60个主要养禽县区随机抽取采集规模禽场和散养户血清样品,进行高致病性禽流感H5和H7免疫抗体检测,并对检测数据进行统计和分析.; 单泽枫徐小燕董永毅; 关键词：烈性传染病动物传染病禽流感疫苗免疫抗体强制免疫

四川省宜宾市翠屏区2017—2021年禽流感H5亚型抗体水平监测与分析: 2023年; 为评估四川省宜宾市翠屏区禽流感疫苗的临床免疫效果,对近5年14个镇、街道的家禽采取简单随机抽样的方法进行禽流感H5亚型免疫抗体检测。结果显示:2017—2021年禽流感抗体免疫合格率均达到了农业农村部标准,其中鸡禽流感个体抗体合格率为83.03%,鸭禽流感个体抗体合格率为76.89%,家禽的抗体水平与季节不具有一定相关性。; 潘延乐李常银尹华江王颖旺陈燕凌吴玉疆赵福强; 关键词：禽流感H5亚型抗体水平

编码禽流感H5N1 HA的新城疫病毒及其在制备生物佐剂二联疫苗中的应用: 本发明公开了编码鸡禽流感HA的鸡新城疫病毒株及其在制备新型生物佐剂二联疫苗中的应用。本发明提供的新城疫重组病毒rClone30‑HA‑chGM‑CSF；新城疫重组病毒rClone30‑HA‑chGM‑CSF中HA如下(a...; 任桂萍郭笑辰魏蓝孙文影

哺乳动物细胞表达抗高致病性禽流感H5N1病毒单分子抗体的研究: H5N1型高致病性禽流感病毒是一种可以在禽类间传播的传染性病原体。高致病性禽流感病毒(Hig{5}lypat{5}ogenicavianinfluenzavirus,HPAIV)的致病性强，不仅在禽类中造成严重的传染病，且发病率...; 王瑜; 关键词：高致病性禽流感病毒细胞表达免疫活性

2019年-2021年长丰县高致病性禽流感H5和H7免疫抗体监测与分析: 高致病性禽流感是由正黏病毒科流感病毒属引起家禽烈性的传染病,是国家强制免疫的动物传染病,发病率高、病死率高。近年来,长丰县养禽业发展迅速,年出栏家禽达3600万羽以上,分布14个乡镇,养殖模式有公司+农户、规模场、散养户...; 张多敏; 关键词：高致病性禽流感血凝和血凝抑制试验血清学监测

禽流感H5N1亚型病毒样颗粒表达与组装: 禽流感（avianinfluenza,AI）是由A型流感病毒引起的禽类的一种呼吸道疾病。禽流感主要的预防和控制手段是疫苗接种。目前广泛使用的流感灭活疫苗，对呼吸道不能诱发有效的黏膜免疫,尽管能抑制病毒在体内的扩散，具有减...; 薛倩; 关键词：H5N1亚型禽流感多拷贝整合病毒样颗粒绿色荧光蛋白遗传进化分析

禽流感H5亚型流行病学监测调查: 2021年; 禽流感作为影响禽业发展的主要疫情,在世界范围内时有发生,2020年在国内外均有H5N6亚型和H5N8亚型高致病性禽流感疫情发生的报道,给养殖者造成了较大的经济损失。为了了解北京市昌平区高致病性禽流感防控措施的效果,笔者随机抽检了一个存栏量40000只蛋鸡的养殖场,该场鸡只均经过重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(细胞源,H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9H7-Re2株)的免疫。; 吕艳秋黄东风姚学军康晓杰刘志忠白若雨薛勇王岳伟邱海莲刘鑫袁梦仪张震东陈继锋赵志荣; 关键词：流行病学监测禽流感H5亚型 H5N1 三价灭活疫苗存栏量细胞源

崇左市重组禽流感H5+H7二联三价灭活疫苗免疫抗体监测与分析被引量：2: 2021年; 禽流感因其病原即禽流感病毒的致病性和毒力之不同,可分为非致病性、低致病性和高致病性3大类。其中高致病性禽流感的危害最为严重,不仅可致易感禽类90%~100%的死亡率,还可引起人的感染,甚至死亡,严重危害公共卫生安全[1]。该病是家禽业中的常见疾病,当家禽养殖场暴发禽流感时,大量家禽死亡,严重影响家禽场的正常运转,给养殖户造成较大的损失。近年来,随着禽流感病毒的不断进化和突变,禽流感的流行状况在世界范围内呈上升趋势[2]。; 秦桂清黄丽非张色萍李剑锋龙凤农洁田韦春葵; 关键词：非致病性家禽业

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