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大肠杆菌利用不同碳源生产N-乙酰神经氨酸的研究
2025年
N-乙酰神经氨酸是最常见的一种唾液酸,通常位于细胞膜表面糖蛋白和糖脂的末端,具有多种生物学功能。由于其独特的生理和生化性质,N-乙酰神经氨酸在制药、化妆品和食品行业的应用越来越广泛,需求量不断增加。N-乙酰神经氨酸在大肠杆菌中的异源生物合成需要与中心碳代谢过程竞争前体物,因此,碳源利用效率,以及碳代谢流在细胞生长与N-乙酰神经氨酸合成中的分配,直接影响N-乙酰神经氨酸的合成效率。该研究从碳源利用调控角度,比较了葡萄糖、甘油,以及两者混合利用对N-乙酰神经氨酸合成的影响。在单一葡萄糖碳源条件下,菌株NEU5AC-2中pfkA的敲除减弱了中心碳代谢的强度,减少了副产物乙酸的积累,协调了前体物N-乙酰甘露糖胺与磷酸烯醇式丙酮酸的供应,5 L发酵罐分批补料发酵38 h产生23.8 g/L N-乙酰神经氨酸,获得了较高的发酵生产水平,具有较强的工业应用潜力。该研究可以为其他以糖酵解途径的中间代谢物为前体物的异源产物合成提供借鉴。
伊进行宗媛孙超张晓雨耿自豪孙文超张春月刘政凯熊雯雯唐宇琳马倩
关键词:大肠杆菌N-乙酰神经氨酸混合碳源代谢工程
一种产N-乙酰神经氨酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用
本发明公开了一种产N‑乙酰神经氨酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明通过敲除6‑磷酸果糖激酶、甘油激酶引入甘油激酶突变体、用葡萄糖促进扩散转运蛋白替换PTS磷酸转移酶I并进行启动子优化,使重组...
刘延峰陈坚堵国成李江华刘龙武耀康吕雪芹周雨桑
N-乙酰神经氨酸中通过抑制Nrf2轴促进缺氧/复氧损伤的H9C2心肌细胞发生铁死亡
2025年
目的基于铁死亡探讨N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)加剧H9C2大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/RI)的影响及作用机制。方法以大鼠心肌细胞株H9C2细胞作为研究对象,将细胞分为Control组、H/R 0 h组、H/R 3 h组、H/R 6 h组、H/R 9 h组、H/R 12 h组和H/R 15 h组,在缺氧缺糖8 h,分别复氧复糖0、3、6、9、12、15 h建立细胞缺氧/复氧损伤模型模拟心肌缺血再灌注损伤,通过实验选择最佳复氧时间进行后续实验。根据最佳复氧时间,复氧时给予不同Neu5Ac浓度的完全培养基作为复氧液,将细胞分为Control、0、5、10、20、30、40、50、60 mmol/L组,通过实验选择最佳药物浓度进行后续实验。根据前述最佳复氧时间和最佳给药浓度探讨Neu5Ac对H9C2心肌细胞加剧损伤的机制,将H9C2心肌细胞分为5组:Control组、H/R组、H/R+Neu5Ac组、H/R+Fer-1(铁死亡抑制剂)组、H/R+Neu5Ac+Fer-1组。通过检测5组细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,判断各组细胞氧化应激水平;使用FerroOrange荧光探针和C11 BODIPY 581/591荧光探针分别检测细胞内Fe^(2+)和脂质过氧化物(Lipid ROS)水平;此外,通过Western blotting检测Neu5Ac在H9C2心肌细胞H/RI中对核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、血红素加氧酶-1(HO-1)、铁死亡抑制蛋白1(FSP1)、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(xCT)蛋白表达的影响。结果H9C2心肌细胞缺氧缺糖8 h后,H/R 6 h组和除H/R 9 h组之外的其他组相比,Nrf2、GPX4、HO-1、FSP1蛋白表达最少,且差异有统计学意义(P<0.001)。与Control组相比,不同浓度药物的实验组细胞活力均明显降低(P<0.0001),且随药物浓度逐渐增大,细胞活力逐渐减小,并测得该药物的半抑制浓度IC_(50)=30.07 mmol/L。选择心肌细胞未发生明显铁死亡的时间,即缺氧缺糖8 h合并复氧复糖3 h,且复氧复糖时Neu5Ac浓度为30 mmol/L进行后续实验。结果显示,Neu5Ac可以提高SOD活性,增加Fe^(2+)和Lipid ROS水平,降低Nrf2、GPX4�
季春斐左宗超王钧李妙男
关键词:N-乙酰神经氨酸心肌细胞
一种具有抑制神经氨酸酶活性的组合物及其应用
本发明公开了一种具有抑制神经氨酸酶活性的组合物及其应用,包括,陈皮粉和桔梗粉;其中,以质量比计,所述陈皮粉和桔梗粉的比例为5:2~4。本发明以陈皮粉和桔梗粉为主要功效成分,其中陈皮粉:桔梗粉=5份:3份进行组合,制得的食...
霍少峰陈朋徐秋语陈倩莹
产生包含神经氨酸酶的广泛保护性疫苗组合物的方法
本公开文本涉及一种用于产生重组神经氨酸酶(NA)多肽的基于簇的共有化方法。本公开文本进一步涉及包含所述该重组NA多肽的流感疫苗组合物。
T·斯特拉格内尔E·奥洛R·奥曼T·沃格尔X·撒伦斯E·乔布
一种靶向神经氨酸酶的载药纳米粒及其制备方法和应用
本发明公开了一种靶向神经氨酸酶的载药纳米粒及其制备方法和应用,属于药物制剂技术领域。本发明通过酯键连接将多聚唾液酸与聚乳酸羟基乙酸连接得到结构和性能稳定的载药纳米粒,并且该载药纳米粒具有靶向神经氨酸酶的作用,同时具有较快...
雷志鑫姚龙福康晋铭蔡小丽孙涛垒
一种pH/神经氨酸酶双响应载药纳米粒及其制备方法和应用
本发明公开了一种pH/神经氨酸酶双响应载药纳米粒及其制备方法和应用,属于药物制剂技术领域。该载药纳米粒包括多聚唾液酸和氨基酸,多聚唾液酸侧链上的羧基与氨基酸中的氨基通过酰胺键连接;本发明通过酰胺键将多聚唾液酸与氨基酸连接...
雷志鑫晋铭姚龙福康蔡小丽孙涛垒
基于亲和超滤-液质联用技术的柴胡中神经氨酸酶抑制剂筛选
2025年
目的基于超高效液相色谱-轨道阱高分辨质谱(UPLC-HR-Orbitrap-MS)和亲和超滤技术,筛选柴胡中的神经氨酸酶抑制剂,寻找具有神经氨酸酶抑制活性的单体并进行体外验证。方法建立柴胡提取物的UPLC-HR-Orbitrap-MS分析方法,结合亲和超滤实验筛选柴胡中能够与神经氨酸酶特异性结合的活性单体成分,通过质谱解析及对照品验证确定成分,对筛选的活性单体进行体外神经氨酸酶抑制检测,并采用分子对接分析潜在的对接位点。结果在柴胡中共筛选出能够与神经氨酸酶特异性结合的单体化合物10个,包括皂苷类、黄酮类和酚酸类,其中6″-O-柴胡皂苷A等的神经氨酸酶体外抑制活性为49.53%~78.07%,分子对接结果与体外神经氨酸酶结果存在差异。结论亲和超滤-液质联用技术能够快速筛选中药中特异性活性成分,为中药活性标志物的发现提供新思路。
田振华马祯池冰清王丙康李彩玉周洪雷
关键词:柴胡神经氨酸酶柴胡皂苷
具有抑制病毒神经氨酸酶NA和病毒3CLpro酶作用的中药组合物及其应用
本发明公开了具有抑制病毒神经氨酸酶NA和病毒3CLpro酶作用的中药组合物及其应用,涉及中药技术领域。该中药组合物,包括香附提取物和香茅提取物。该中药组合物同时具有抑制病毒神经氨酸酶NA和病毒3CLpro酶的作用,并且其...
曾永长梁少瑜吴俊洪何康李新萍徐丹丹姜倩倩
一种电刺激降低N-羟乙酰神经氨酸的装置
本实用新型涉及红肉处理装置技术领域,公开了一种电刺激降低N‑羟乙酰神经氨酸的装置,包括箱体,所述箱体设置在肉制品加工生产线上,所述箱体中部开设有输送通道;输送件,设置在所述输送通道内部顶端,所述输送件用于向所述输送通道内...
凌绍乐朱秋劲温健芬毕晟晖周颖刘远远曾露任思铭

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胡艾希
作品数:657被引量:717H指数:14
供职机构:湖南大学
研究主题:化学结构式 噻唑 神经氨酸酶抑制剂 直链 1,2,4-三唑
叶姣
作品数:339被引量:118H指数:7
供职机构:湖南大学
研究主题:化学结构式 直链 噻唑 1,2,4-三唑 神经氨酸酶抑制剂
刘艾林
作品数:204被引量:990H指数:16
供职机构:中国医学科学院北京协和医学院药物研究所
研究主题:神经氨酸酶抑制剂 流感病毒 直链 阿尔茨海默病 亚氨基
梁永东
作品数:9被引量:0H指数:0
供职机构:湖南大学
研究主题:二氢呋喃 呋喃 药物组合物 抗癌药物 神经氨酸酶抑制剂
董征学
作品数:32被引量:68H指数:5
供职机构:安丘市人民医院
研究主题:CCL20 创面愈合 酶预处理 神经氨酸 微粒皮移植