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褐飞虱凝集素基因NlCTL4的克隆及功能分析
2024年
C型凝集素(C-type lectins,CTLs)是广泛存在于昆虫体内一类含糖识别结构域的蛋白超家族,通常作为模式识别受体,在识别外来病原微生物并启动昆虫先天免疫过程中发挥重要功能。本研究克隆并鉴定了一条褐飞虱CTL编码基因NlCTL4(GenBank登录号:OQ032531),其c DNA序列全长936 bp,编码311个氨基酸。序列分析显示,Nl CTL4蛋白N端存在一段由21个氨基酸残基组成的信号肽,C端仅具有一个典型的糖识别结构域,属于S型CTLs。系统发育分析表明,Nl CTL4与半翅目其他昆虫的CTLs聚为一支,其中与玻璃翅叶蝉CTL亲缘关系最近。q RT-PCR分析显示,Nl CTL4基因在褐飞虱不同发育阶段和不同组织中均有表达。Nl CTL4在5龄若虫期的表达量最高,且在高龄若虫期(4~5龄)的表达量显著高于低龄若虫(1~3龄),但在雌、雄成虫中其表达量无显著差异。Nl CTL4在褐飞虱雌成虫肠道中表达量最高,脂肪体次之,在血淋巴中表达量最低。大肠杆菌(革兰氏阴性细菌)、金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性细菌)和金龟子绿僵菌(丝状病原真菌)均能显著诱导Nl CTL4的表达水平,其中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在诱导36 h时Nl CTL4的表达量达到顶峰,金龟子绿僵菌接种24 h时的诱导水平最高。RNAi分析结果显示,抑制Nl CTL4表达后褐飞虱5龄若虫存活率及对金龟子绿僵菌侵染的抵御能力显著降低。本研究结果初步证实了褐飞虱Nl CTL4在宿主生长发育和免疫防御过程中发挥重要调控作用,且在开发褐飞虱RNAi抗虫和病原真菌防虫技术中具有重要的潜在应用价值。
王彦丹邵珠龙王正亮俞晓平
关键词:褐飞虱C型凝集素基因克隆RNA干扰
甘露糖结合凝集素基因多态性血浆甘露糖结合凝集素浓度与儿童肺部感染的相关性分析
2024年
目的 探究甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)基因多态性及血浆MBL浓度与儿童肺部感染的关系。方法选取2018年7月—2021年7月民乐县妇幼保健院收治的1 67例社区获得性肺炎患儿为感染组,另选取同期90名健康体检儿童为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测受试者MBL第1外显子54密码子位点基因型,并检测血浆MBL及相关炎症因子[白细胞介-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、降钙原(procalcitonin,PCT)]水平,采用临床肺部感染评分量表(clinical pulmonary infection scor,CPIS)评价肺部感染严重程度。结果感染组与对照组MBL 54密码子基因型分布、Hardy-Weiberg定律理论分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。感染组血浆MBL水平显著低于对照组,IL-6、TNF-α、PCT水平均显著高于对照组(P<0.05)。GGC/GAC型、GAC/GAC型患儿血浆MBL水平显著低于GGC/GGC型,IL-6、TNF-α、PCT水平均显著高于GGC/GGC型(P<0.05)。Pearson相关分析法显示,患儿血浆MBL与血浆IL-6、TNF-α、PCT表达及CPIS评分均呈负相关(r=0.392、0.31 5、0.446、0.297,P<0.05)。结论 MBL 54密码子GGC→GAC点突变及低血浆MBL水平可能与儿童肺部感染易感性及病情进展有关。
陈才高艳霞韩凤张郡洳陈积英
关键词:肺部感染儿童甘露糖结合凝集素基因多态性炎症因子
花鲈半乳糖凝集素基因家族的鉴定及在不同环境因子胁迫下表达响应
2024年
为探究在花鲈(Lateolabrax maculatus)响应环境因子胁迫中半乳糖凝集素(Galectins)发挥的作用,本研究通过全基因组水平鉴定获得了花鲈的14个Galectin基因(LGALS1、LGALS2a、LGALS2b、LGALS3a、LGALS3ba、LGALS3bb、LGALS4、LGALS8a、LGALS8b、LGALS9、LGALS17、GRPa、GRPb和GRPc)。通过系统发育、拷贝数、共线性和基因结构分析证实了基因注释的准确性和结构上的保守性。利用转录组测序数据进行Galectin基因的组织表达及在多种环境因子胁迫下的表达模式分析。研究表明,Galectin家族各基因在花鲈的7个组织(肝、鳃、脾、胃、脑、精巢和卵巢)中广泛表达,且有6个基因(LGALS3ba、LGALS4、LGALS8a、LGALS9、LGALS17和GRPa)表现出明显的组织特异性。Galectin家族的不同成员在4种环境因子胁迫下(低氧、碱度、高温及盐度适应)表现不同程度的表达响应,其中LGALS3a、LGALS3ba、LGALS4、LGALS17和GRPb在4种环境胁迫中表现出显著的差异表达,表明其广泛参与了对环境胁迫的响应与调控。
郑圆温海深李吉方方秀王灵钰张冲陶泽鑫张永航李昀
关键词:胁迫响应
镉胁迫对合浦珠母贝C型凝集素基因表达及部分生理指标的影响
2024年
【目的】明确合浦珠母贝对镉胁迫的免疫响应机制,为丰富贝类的免疫生物学研究提供理论基础。【方法】以2龄合浦珠母贝为研究材料,通过RACE克隆合浦珠母贝的2个C型凝集素(CTL)基因(PmCTL1和PmCTL4),并采用实时荧光定量PCR检测这2个基因在合浦珠母贝各组织中的表达情况。以4.0 mg/L氯化镉(CdCl2)溶液对合浦珠母贝进行胁迫,分别于胁迫0、3、6、12、24和48 h后采集肝胰腺及血淋巴组织,检测肝胰腺中的PmCTL1和PmCTL4基因表达情况及血清酸性磷酸酶(ACP)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性变化;同时以0.5 mg/L氯化镉溶液胁迫21 d,观察统计合浦珠母贝肝体指数(HSI)的变化趋势。【结果】克隆获得的PmCTL1、PmCTL4基因c DNA序列全长分别为853和1113 bp,对应的编码蛋白各含有1个典型的CRD结构域,且CRD结构域中均含有6个保守的半胱氨酸,与其他软体动物的相似性较高。PmCTL1和PmCTL4基因在合浦珠母贝的肝胰腺、性腺、闭壳肌、鳃和外套膜等组织中均有表达,但二者具有不同的组织表达分布特征;肝胰腺中PmCTL1和PmCTL4基因相对表达量随镉胁迫时间的推移呈明显的波动变化趋势,在镉胁迫6 h时二者的相对表达量均最低,PmCTL1基因在镉胁迫3 h时达最高值[约是镉胁迫前(0 h)的3.23倍],PmCTL4基因在镉胁迫12 h时达最高值[约是镉胁迫前(0 h)的2.03倍]。合浦珠母贝血清ACP活性在镉胁迫24 h时达最高值,CAT活性在镉胁迫6 h时达最高值,SOD活性在镉胁迫3 h时达最高值;合浦珠母贝HSI随镉胁迫时间的推移而逐渐下降。【结论】在镉胁迫下合浦珠母贝发生明显的免疫应激,Pm CTL1、PmCTL4基因及血清ACP、CAT和SOD均能响应镉胁迫,即CTL和血清酶类在贝类的镉解毒过程中发挥重要作用,且主要发生在肝胰腺组织中。
刘忠华陈洁黄晓玲涂淏天梁海鹰
关键词:合浦珠母贝镉胁迫肝胰腺
大口黑鲈(Micropterus salmoides)半乳糖凝集素基因的鉴定、组织表达特性及功能研究
钟德斌
携带鲎凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及应用
本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带鲎凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及应用。溶瘤痘苗病毒携带鲎凝集素基因,鲎凝集素基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示;溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将鲎...
李恭楚
一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法
本发明公开了一种克氏原螯虾甘露聚糖结合凝集素基因敲除突变体的构建方法,属于生物技术领域。该方法包括:1)筛选获得可高度特异识别克氏原螯虾基因组中甘露聚糖结合凝集素基因的sgRNA;2)进行性腺注射,在自然交配获得的克氏原...
董张及刘梅
携带海绵凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及用途
本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带海绵凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及用途,该海绵凝集素基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。重组溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将AVL的基因序列通过X...
李恭楚
国产大蒜凝集素基因的克隆与生物信息学分析
2023年
为了获得国产大蒜新的凝集素家族基因,根据NCBI数据库中已公布的大蒜凝集素基因序列设计引物,从国产大蒜的鳞茎中提取总RNA,采用RT-PCR技术分离克隆出一个大蒜凝集素基因,命名为ASA-C。ASA-C全长546 bp,包含1个471 bp的ORF,编码156个氨基酸的多肽。利用网站和分析软件对其进行生物信息学分析。结果 表明:ASA-C与已公布的同源二聚体大蒜凝集素ASAⅡ基因具有较高同源性;推测该基因编码多肽的N端有一典型跨膜结构域的信号肽,多肽序列上有3个甘露糖特异性结合凝集素共有基序(Q-D-N-V-Y)。多重序列比对以及系统进化树的结果 表明大蒜凝集素的保守性很强,这为进一步开发利用大蒜凝集素蛋白的功能奠定了基础。
刘琴胡曼朱颖陈伟达陈禅友
关键词:大蒜凝集素基因克隆生物信息学分析
咪唑类物质KK-42对日本沼虾表皮C型凝集素基因表达的影响
日本沼虾(Macrobrachiumnipponense)是我国重要的淡水经济养殖虾类,由于外界环境、养殖密度等因,日本沼虾易感染病原体导致死亡率增加。实验室前期研究显示,咪唑类物质KK-42可以提高日本沼虾对嗜水气单...
彭彦新
关键词:日本沼虾C型凝集素基因表达

相关作者

郭佩佩
作品数:4被引量:7H指数:1
供职机构:南京农业大学
研究主题:凝集素基因 抗虫性 转基因烟草 防卫基因 大豆凝集素
郝峥嵘
作品数:26被引量:122H指数:5
供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所
研究主题:小麦 植株再生 花药培养 愈伤组织 凝集素基因
刘庆法
作品数:12被引量:128H指数:6
供职机构:复旦大学生命科学学院遗传学研究所
研究主题:小麦 基因表达 凝集素基因 单倍体 凝集素
李亚栋
作品数:31被引量:56H指数:5
供职机构:河北省农林科学院
研究主题:引物 抗病基因 黄瓜 番茄 番茄育种
鲍锦库
作品数:132被引量:328H指数:10
供职机构:四川大学
研究主题:凝集素 化学修饰 荧光光谱 蛋白 构象